新·第3章 培养基及一般操作技术-精.pptVIP

制作者：吴翠云 第三章 培养基和一般操作技术 第三章 培养基及一般操作技术 培养基culture medium是植物组织培养的重要基质。 在离体培养条件下，不同种植物的组织对营养有不同的要求，甚至同一种植物不同部位的组织对营养的要求也不相同，只有满足了它们各自的特殊要求，它们才能很好地生长。因此，没有一种培养基能够适合一切类型的植物组织或器官。 第三章 培养基及一般操作技术 在建立一项新的培养系统时，首先必须找到一合适的培养基，培养才有可能成功。在植物组织培养历史进程中，事实上也紧密地伴随着培养基的研制史。 对植物的营养要求的不断认识，对已有培养基的改进，或者将新发现的植物激素、新的有益成分应用于培养基之中，都大大促进了组织培养研究的迅速发展，取得越来越多的成功。 第三章 培养基及一般操作技术 第一节 培养基的种类和成分 一、培养基种类 二、培养基成分 第二节 培养基制备 一、母液配制和保存 　　　 　 二、培养基配制、分装和灭菌 第三节 一般操作技术 一、灭菌 　　　 三、培养 　 二、接种 四、驯化移栽 第一节 培养基的种类和成分 一、培养基的种类 一、培养基的种类 1962年由Murashige和Skoog为培养烟草细胞而设计的。 无机盐离子 浓度高，硝酸盐含量较高 用于植物的器官、花药、细胞和原生质体培养 一、培养基的种类 1968年由Gamborg等为培养大豆根细胞而设计的。 含有较低的铵，这可能对不少培养物的生长有抑制作用。 双子叶植物 尤其木本植物组培可选择 一、培养基的种类  White培养基特点： 1937年由White为培养番茄根尖而设计的，1943年随其专著的出版而问世。1963年又作了改良，称作White改良培养基，提高了MgSO4的浓度和增加了硼素。 无机盐数量较低 适于生根培养。 一、培养基的种类 N6培养基特点： 1974年朱至清等为水稻等禾谷类作物花药培养而设计的。 成分较简单， KNO3 和 (NH4)2SO4含量高 适合花药培养 一、培养基的种类 KM-8P培养基特点： 1974年为原生质体培养而设计的。 有机成分较复杂，它包括了所有的单糖和维生素， 广泛用于原生质体培养，包括融合的培养。 一、培养基的种类 二、培养基的成分 （一）水 水是植物原生质体的组成成分，也是一切代谢过程的介质和溶媒。它是生命活动过程中不可缺少的物质。 配制培养基母液时要用蒸馏水，以保持母液及培养基成分的精确性，防止储藏过程发霉变质。大规模生产时可用自来水。但在少量研究上尽量用蒸馏水，以防成分的变化引起不良效果。 二、培养基的成分 （二）无机元素(inorganic element) 无机营养成分就是人们平常所说的矿物质、无机盐或无机元素。它们在植物生活中具有非常重要的作用。 如氮（N）、硫（S）、磷（P）是蛋白质、氨基酸、核酸和许多生物催化剂即酶的主要或重要组分。它们与蛋白质、氨基酸、核酸和酶的结构、功能、活性等有直接的不可缺少的关系。 （二）无机元素(inorganic element) 氮占蛋白质含量的16%-18%，在植物生命活动中占有首要的地位，故又称为生命元素。 磷是能量货币腺苷三磷酸（ATP）的主要成分之一，与全部生命活动紧密相连，在糖代谢、氮代谢、脂肪转变等过程中不可缺少。 （二）无机元素(inorganic element) 钾:对于参与活体内各种重要反应的酶起着活化剂的作用，钾供应充分时糖类合成加强，纤维素和木质素含量提高，茎秆坚韧，植株健壮。 硫：胱氨酸、半胱氨酸、蛋氨酸等氨基酸中都含有硫，这些氨基酸几乎是所有蛋白质的构成分子。 镁离子（Mg2+):是叶绿素分子结构的一部分，缺少镁，叶绿素就不能形成，叶子就会失绿，就不能进行光合作用。镁也是染色体的组成成分，在细胞分裂过程中起作用。 （二）无机元素(inorganic element) 钙:是细胞壁的组分之一，果胶酸钙是植物细胞胞间层的主要成分，缺钙时细胞分裂受到影响，细胞壁形成受阻，严重时幼芽、幼根会