分子生物学平台上的食品微生物快速检测及鉴定技术__培训课件.pptVIP

* * * * * Further multiplexing facilitated by incorporation of mobility modifiers and multiple dyes；在真核生物基因组中存在大量的数目可变的衔接重复序列(variable number tandem repeat，VNTR)。VNTR是由几个核苷酸(最常见为2～4个)作为核心序列串联重复形成的DNA序列，在原核生物基因组中也发现了这种序列，但它的一般长度不到原核生物基因组的1/10。这种序列可存在于原核生物基因中，也可存在于基因之间。 * * 大肠杆菌O157：H7中发现，有7个VNTR，重复数从6～30个碱基不等，其中6个存在于染色体DNA上，另一个存在于编码毒力基因的质粒上。通过不同菌株基因组核心序列串联重复数的差异，可检测大肠杆菌O157：H7的多态性。Lindstedt等［24］用MLVA方法，将69株大肠杆菌O157分为45个不同型别，用PFGE方法将它们分为44个，证明ML2VA与PFGE相比具有相同的灵敏度和更高的特异性，具有很多优点。首先，它无需抽提基因组DNA；其二，该法重复性好，即使不同实验者也可得到相同的条带形式；第三，可制定统一标准，易于各实验室间进行比较；第四，能在较短时间内处理大量样品。运用分子生物学分型方法检测大肠杆菌O157：H7的多态性，为调查其是否潜