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.蛋白质

* 化学法 溴化氰水解法(CNBr):  切割Met的羧基所形成的肽键。Rm=Met,形成高丝氨酸内酯。 用羟胺断裂:  它断裂-Asn-Gly-,但专一性不高。蛋白质中出现机率低,适于分子量大的蛋白质序列的测定。 Rm=Asn Rn=Gly 7、肽段氨基酸序列的测定 所得资料: N-末端残基 H C-末端残基 S 第一套肽段 OUS PS EOVE RLA HOWT 第二套肽段 SEO WTOU VERL APS  HO 8、肽段的拼接 所得资料: N-末端残基 H C-末端残基 S 第一套肽段 OUS PS EOVE RLA HOWT 第二套肽段 SEO WTOU VERL APS  HO 9 、确定原多肽链中二硫键的位置 采用胃蛋白酶:专一性低,切点多。肽段比较小,分离、鉴定比较容易。作用pH在酸性范围。 肽段混合物进行的对角线电泳 对角线电泳 暴露在过甲酸蒸气中使二硫键断裂 + + 巯基的保护 例:有一个A肽? ①酸水解得到:Ala、Arg、Ser、Glu、 Phe、Met; ②当A肽与FDNB试剂反应后得:DNP-Ala; ③当A肽用CNBr降解时得到:游离的Ser和一种肽 ; ④当A肽用胰蛋白酶降解时得到两种肽:    一种含Ala、Arg, 另一种含其它氨基酸 ⑤当A肽用糜蛋白酶(胰凝乳蛋白酶)降解时得到两种肽:    一种含Met、Ser, 另一种含其它氨基酸;    问A肽的氨基酸排列顺序如何? 答:Ala-Arg-Glu-phe-Met-Ser 人有了知识,就会具备各种分析能力, 明辨是非的能力。 所以我们要勤恳读书,广泛阅读, 古人说“书中自有黄金屋。 ”通过阅读科技书籍,我们能丰富知识, 培养逻辑思维能力; 通过阅读文学作品,我们能提高文学鉴赏水平, 培养文学情趣; 通过阅读报刊,我们能增长见识,扩大自己的知识面。 有许多书籍还能培养我们的道德情操, 给我们巨大的精神力量, 鼓舞我们前进。 是一个检测和定量氨基酸和蛋白质的重要反应。茚三酮在弱酸性溶液中与氨基酸共热,所有具有游离氨基的氨基酸都生成紫色化合物(?570)。 脯氨酸和羟脯氨酸由于是一个亚氨基酸,不释放氨,所以与茚三酮反应直接生成的是黄色化合物(?440)。 肽平面:连接在肽键上的六个原子共处于一个平面上。 肽单位:肽链主链上的重复结构,Cα- CO – NH – Cα。 二面角:在多肽链里,Cα碳原子上的 Cα- C 和 Cα– N 可以绕轴旋转,角度为ψ和φ,这就是α-碳原子上的一对二面角。它决定了由α-碳原子连接的两个肽单位的相对位置。 这些结构可在一条多肽链的不同区段形成。 由R基的短程顺序决定。 多肽链中的各个肽平面围绕同一轴旋转,形成螺旋结构,螺旋一周,沿轴上升的距离即螺距为0.54nm,含3.6个氨基酸残基;两个氨基酸之间的距离为0.15nm 第一个氨基酸残基的酰胺基团的-CO基与第四个氨基酸残基酰胺基团的-NH基形成氢键 肌球蛋白:由两条相同的重链和两对不同的轻链组成。头部有ATP结合位点和肌动蛋白结合位点。装配成骨骼肌的粗丝。 肌动蛋白:球状单体,组成骨骼肌的细丝。 PPt-19由两条或多条;链间的氢键;肽链的主链呈锯齿桩折叠构象。大多数β片层中的一些β折叠是按右手方向扭曲的。 在?-折叠中,?-碳原子总是处于折叠的角上,氨基酸的R基团处于折叠的棱角上并与棱角垂直,?-折叠结构的氢键主要是由两条肽链之间形成的;也可以在同一肽链的不同部分之间形成。几乎所有肽键都参与链内氢键的交联,氢键与链的长轴接近垂直。 ?-折叠有两种类型。一种为平行式,即所有肽链的N-端都在同一边。另一种为反平行式,即相邻两条肽链的方向相反。影响因素:同?-螺旋。 在?-转角部分,由四个氨基酸残基组成.四个形成转角的残基中,第三个一般均为甘氨酸残基.弯曲处的第一个氨基酸残基的 -C=O 和第四个残基的 –N-H 之间形成氢键,形成一个不很稳定的环状结构。这类结构主要存在于球状蛋白分子中。显示一定的刚性;又有柔性。转角结构通常负责各种二级结构单元之间的连接作用,它对于确定肽链的走向起着决定性的作用。 β-转角是多肽链180°回折部分所形成的一种二级结构,其结构特征为: ①主链骨架本身以大约180°回折 ② ③构象依靠第一残基的-CO基与第四残基的-NH基之成氢键来 是在β折叠的2个相邻的氢键中多出一个氨基酸残基,形成一个突起,干扰其氢键配对 不同的蛋白质,自由回转的数量和形式各不相同.分两类:受氨基酸残基侧链的影响较大,   ① 紧密环   ② 连接条带 有更大的任意性通过主链间及主链与侧链间氢键维持其构象,. 经常是构成酶活性部位和其它蛋白质特异的功能部位。与生物活性有关,对外界理化因子极为敏感. 若干个二级结构

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