raav 2gpⅱb-gpⅲa载体构建和体外表达、功能实验.docVIP

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2017-01-15 发布于天津
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载体构建和体外表达功能实验作者王凯彭建强陈方平吴小兵摘要为了研究载体介导的血小板无力症基因治疗的可行性构建了由启动子调控的病毒载体并采用多种方法验证了和病毒载体在真核细胞中的表达能力其中包括用方法检测细胞感染小时后目的基因在水平的表达用流式细胞术的方法检测不同和目的基因表达之间的量效关系采用的方法检测细胞感染小时后目的基因在蛋白水平的表达用免疫荧光法检测细胞感染小时后目的基因在细胞表面的表达以及应用结合试验验证所表达的蛋白功能结果表明在条件下在细胞感染小时后即可在水平上检测到目的基因的表达在小时

rAAV 2GPⅡb/GPⅢa载体构建和体外表达、功能实验 nbsp;nbsp;nbsp;nbsp;nbsp;nbsp;nbsp;nbsp;nbsp;nbsp;nbsp;nbsp;nbsp;nbsp;nbsp;作者：王凯，彭建强，陈方平，吴小兵【摘要】nbsp; 为了研究rAAV载体介导的血小板无力症基因治疗的可行性，构建了由CMV启动子调控的rAAV2-Ⅱb、rAAV2-Ⅲa病毒载体，并采用多种方法验证了rAAV2-Ⅱb和rAAV2-Ⅲa病毒载体在真核细胞中的表达能力，其中包括用RT-RCR方法检测BHK-21细胞感染24小时（MOI=