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两种制备冷沉淀方法的比较
两种制备冷沉淀方法的比较
nbsp;nbsp;nbsp;nbsp;nbsp;nbsp;nbsp;nbsp;nbsp;nbsp;nbsp;nbsp;nbsp;nbsp;nbsp;nbsp;nbsp;nbsp;nbsp;nbsp;nbsp;nbsp;nbsp;nbsp;nbsp;nbsp;nbsp;nbsp;nbsp; 作者:杨玉峰,黄春萍,赵 云,沈华仙
【摘要】nbsp; 目的:通过对改良快速融化离心法和水浴虹吸法制备冷沉淀的质量比较,选择合适的制备冷沉淀的方法。方法:利用血凝分析仪检测冷沉淀中FⅧ和Fg的含量,电子称称量血袋重量并计算容量,计算三者的合格率。结果:改良快速融化离心法和水浴虹吸法的FⅧ含量(IU/袋)分别为:(86.75±24.91)、(62.91±22.87),差异有显著性(P<0.05),合格率分别为:100%、91.7%,差异无显著性(P>0.05);Fg的含量(mg/袋)分别为:(142.16±27.53)、(117.91±31.99),合格率均为:100%,差异无显著性(P>0.05);容量(ml/袋)分别为:(25.4±4.3)、(27.3±2.3),合格率均为100%,差异无显著性(P>0.05)。结论:两种方法都能制备出符合GB18469-2001《全血及成分血质量要求》的冷沉淀,但改良快速融化离心法制备的冷沉淀FⅧ含量要优于水浴虹吸法。
【关键词】nbsp; 冷沉淀;凝血因子Ⅷ;纤维蛋白原;容量;质量标准
冷沉淀是目前临床常用的一种血液成分,是新鲜冰冻血浆在1 ℃~5 ℃的条件下不溶解的白色沉淀物,其主要含有凝血因子Ⅷ(FⅧ),纤维蛋白原(Fg)、vW因子(von Willebrand factor)、凝血因子ⅩⅢ(FⅩⅢ),以及纤维结合蛋白(Fn)等成分。由于其中含有一些不稳定的凝血因子,特别是FⅧ因子,容易降低或失去活性,从而影响冷沉淀的质量。现将两种方法制备的冷沉淀质量情况,报告如下。
1nbsp; 材料和方法
1.1nbsp; 仪器和材料nbsp; 日本Sysmex CA50自动血凝分析仪,试剂:德国Dade Behring Marburg公司生产(APTT,批号:537108;Owrens Veronal缓冲液,批号:527634;乏因子Ⅷ血浆,批号:536502A),苏州医用仪器厂的KJX一Ⅲ型冰冻血浆解冻箱,德国贺利氏6000 i容量冷冻离心机,常熟双杰测试仪器厂生产的GαGDT 1000电子称。
1.2nbsp; 方法
1.2.1nbsp; 原料血浆nbsp; 采集全血后6 h内,3 000 g,4 ℃,10 min,离心分离制备新鲜冰冻血浆(FFP),放入-50 ℃冰箱快速速冻后,置入-20 ℃以下的冰箱保存。冷冻24 h以上的FFP用于制备冷沉淀[1]。
1.2.2nbsp; 改良快速融化离心法nbsp; 将FFP放入(3±1) ℃冰冻血浆解冻箱的恒温循环水槽中,待FFP融化到一半多时取出血浆袋,将还未融化的血浆块捏散成碎冰块,加速其溶解,然后继续放入恒温循环水槽中融化,待剩少许碎冰块时,及时取出,3 000 g,0 ℃,10 min离心,分离出上层血浆,下层(25±5) ml血浆和白色沉淀物即为冷沉淀,将其快速置于低温速度冰箱中冻结。
1.2.3nbsp; 水浴虹吸法nbsp; 将联袋装有FFP袋子置于(3±1) ℃冰冻血浆解冻箱的恒温循环水槽中,另一空袋悬于箱外,两袋之间有一定的落差。FFP融化时,由于虹吸的作用,融化的血浆流入空袋中,剩余的(25±5) ml的有白色结晶颗粒的血浆块即为冷沉淀,将其快速置于低温速度冰箱中冻结。
1.2.4nbsp; FⅧ和Fg的检测方法nbsp; 按试剂说明书操作。
1.2.5nbsp; 容量计算[2]。
1.2.6nbsp; 质量标准nbsp; 按照GB18469-2001《全血及成分血质量要求》规定,由100 ml FFP制备的冷沉淀(0.5 u):FⅧ含量≥40 IU/袋,Fg含量≥75 mg/袋,容量:(25±5) ml,符合质量标准者为合格。
1.2.7nbsp; 统计学方法nbsp; t检验和四格表的确切概率法。
2nbsp; 结果
2.1nbsp; 两种方法制备冷沉淀比较nbsp; 将随机抽取的24袋100 ml FFP,随机分成两组,用上述两种方法分别进行检测,见表1。
表1nbsp; 两种方法制备冷沉淀三种指标比较(略)
2.2nbsp; 两种方法制备冷沉淀的三种指标合格率比较nbsp; 改良快速融化离心法制备的FⅧ含量合格率为100%(12/
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