冬虫夏草菌丝体发酵液中多糖的分离纯化与含量测定.docVIP

冬虫夏草菌丝体发酵液中多糖的分离纯化与含量测定 【摘要】nbsp; 　　［目的］从冬虫夏草菌丝体发酵液中提取，分离虫草多糖，并建立样品中多糖的含量测定方法。［方法］采用D101大孔树脂分离冬虫夏草菌丝体发酵液中的多糖；采用苯酚-硫酸法测定样品中多糖含量。［结果］虫草多糖的得率为142g/L ；样品中虫草多糖的含量为706%。 ［结论］方法简便，准确，重现性好，可用于冬虫夏草菌丝体发酵液中虫草多糖的提取纯化和含量测定。 【关键词】nbsp; 冬虫夏草菌丝体发酵液 多糖 大孔树脂 分离纯化 含量测定 　　Separation, Purification and Content Test of Polysaccharide in Zymotic Fluid of Cordycepts Mycelium 　　Abstract：［Objective］ To extract and separate polysaccharide from Cordyceps mycelium, and establish content test method of polysaccharide in sample. ［Method］ Take foramen magnum resin D101 to separate polysaccharide from the zymotic fluid of Cordyceps mycelium, the phenol-SO2 method to measure polysaccharide in sample. ［Result］ The receiving rate of polysaccharide was 14.2g/L; the content was 70.6% from sample. ［Conclusion］ The said method is simple, convenient, correct, can be used for separation, purification and content measurement of polysaccharide from the zymotic fluid of Cordyceps mycelium. 　　Key words：zymotic fluid of Cordyceps mycelium; polysaccharide; foramen magnum resin; separation and purification; content measurement nbsp;nbsp;nbsp; 　　冬虫夏草(Cordyceps)为麦角菌科真菌冬虫夏草菌Cordyceps sinensis（Berk.）Sacc.寄生在蝙蝠蛾科昆虫幼虫上的子座及幼虫尸体的复合体，是高级滋补药品和名贵中药材。随着它的药用价值不断增大和药用范围的不断扩大，对虫草的需求量也在不断的增加。但是，由于天然虫草严格的寄生性及生长环境的特殊，且因人为因素的破坏，导致产量急剧下降，远远不能满足市场的需求。因此，从20世纪70年代起，人类就开始利用现代生物发酵技术培育虫草菌丝体［1］来代替天然虫草，但是，目前对虫草菌丝体发酵液的开发利用，国内外还是鲜有报道。大孔吸附树脂是20世纪60年代发展起来的新型精制方法［2］。它是一种不含交换基团，具有大孔结构的高分子材料。自从问世以来，已在环保、化工、医药等领域［3］得到广泛利用。本研究采用D101大孔吸附树脂从虫草菌丝体发酵液中分离虫草多糖，且用苯酚-硫酸法测定了样品中多糖的含量，结果表明：本方法操作简单，结果准确，重现性好，为进一步的研究开发提供了依据。 　　1nbsp; 仪器、材料、试剂与样品 　　11nbsp; 仪器与材料nbsp; TD5AWS台式低速离心机（长沙湘仪离心机仪器有限公司）；754型紫外分光光度计（上海精密仪器有限公司）；D101大孔吸附树脂（天津制胶厂）。 　　12nbsp; 试剂nbsp; D葡糖糖(中国药品生物制品鉴定所，批号110833-200503)，乙醇，氯仿，正丁醇，苯酚，硫酸等（均为分析纯）。 　　13nbsp; 样品nbsp; 冬虫夏草菌丝体发酵液由浙江万丰集团制药有限公司提供。 　　2nbsp; 方法与结果 　　21nbsp; 虫草粗多糖的提取nbsp; 取虫草菌丝体发酵液730mL，用80%乙醇沉淀3次，室温下放置24h，离心15min（3000r/min），弃去上清液，取沉淀物，减压干燥，得粗多糖219g。 　　22nbsp; 虫草粗多糖纯化nbsp; 取上述粗多糖21