选修3.3.ppt

3.胚胎干细胞： 【高考警示】(1)滋养层≠饲养层。 ①滋养层：囊胚时期沿透明带内壁扩展和排列的、个体较小的细胞，滋养层最终发育成胎膜和胎盘。 ②饲养层：饲养层细胞一般为输卵管上皮细胞，在干细胞培养时，可作为提供干细胞分裂、增殖的营养细胞。 (2)不同动物胚胎移植的时间不同。 ①牛、羊要培养到桑椹胚或囊胚阶段。 ②小鼠、家兔在桑椹胚前。 ③几乎所有动物都不能到原肠胚阶段移植，因为此时分化程度高，移植成功率很低。 【考题回访】 1.(2014·福建高考)Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如图： (1)步骤①中，在核移植前应去除卵母细胞的　　　　　　　　。 (2)步骤②中，重组胚胎培养到　　　　　期时，可从其内细胞团 分离出ES细胞。 (3)步骤③中，需要构建含有Rag2基因的表达载体。可以根据Rag2 基因的　　　　　设计引物，利用PCR技术扩增Rag2基因片段。用 HindⅢ和PstⅠ限制酶分别在片段两侧进行酶切获得Rag2基因片段。 为将该片段直接连接到表达载体，所选择的表达载体上应具有 　　　　　酶的酶切位点。 (4)为检测Rag2基因的表达情况，可提取治疗后小鼠骨髓细胞 的　　　　　，用抗Rag2蛋白的抗体进行杂交实验。 【解题指南】(1)关键知识：检测目的基因表达的方法是抗原-抗体杂交(免疫)法。 (2)图示信息：过程①利用了动物细胞核移植技术；过程②利用了胚胎工程技术；过程③利用了基因工程的相关技术。 【解析】本题考查基因工程、细胞工程和胚胎工程技术。 (1)步骤①是核移植过程。体细胞核移植前要除去受体卵母细胞的细胞核，原因是若不去掉卵母细胞的细胞核，就会造成细胞里面有两个细胞核，使得遗传物质不稳定。 (2)ES细胞是由早期胚胎(囊胚)的内细胞团分离出来的一类细胞。 (3)步骤③为获取目的基因，并把目的基因导入受体细胞的过程。在生物体外可通过PCR技术扩增目的基因，其条件是模板DNA、根据Rag2基因的核苷酸序列设计的引物、四种脱氧核苷酸、热稳定DNA聚合酶等，另外根据题干可知，获得Rag2基因需要用HindⅢ和PstⅠ限制酶，所以在构建表达载体时，所选择的表达载体上应具有HindⅢ和PstⅠ酶的酶切位点。 (4)检测目的基因是否翻译相应蛋白质时，应采用抗原—抗体杂交(免疫)法，即提取蛋白质，用相应的抗体进行抗原—抗体杂交，看是否有杂交带。 答案：(1)细胞核　(2)囊胚 (3)核苷酸序列　HindⅢ和PstⅠ　(4)蛋白质 2.(2014·山东高考)人组织纤溶酶原激活物(htPA)是一种重要的药用蛋白，可在转htPA基因母羊的羊乳中获得。流程如下： (1)htPA基因与载体用　　　　　　　　　切割后，通过DNA连接酶 连接，以构建重组表达载体。检测目的基因是否已插入受体细胞 DNA，可采用　　　　　　　　　技术。 (2)为获取更多的卵(母)细胞，要对供体母羊注射促性腺激素，使 其　　　　　。采集的精子需要经过　　　　　，才具备受精能力。 (3)将重组表达载体导入受精卵常用的方法是　　　　　。为了获得 母羊，移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行　　　　　。利 用胚胎分割和胚胎移植技术可获得多个转基因个体，这体现了早期 胚胎细胞的　　　　　。 (4)若在转htPA基因母羊的羊乳中检测到　　　　　，说明目的基 因成功表达。 【解题指南】(1)图示信息：转htPA基因母羊羊乳的获得过程。 (2)关键知识：用同种限制酶切割目的基因与载体，获得相同的黏性末端，才能进行碱基互补配对。 【解析】本题主要考查基因工程和胚胎工程。 (1)为保证切割后的载体与切出的目的基因具有相同的黏性末端，应用同种限制酶切割目的基因和载体。 (2)为获取更多的卵(母)细胞，需要对供体母羊进行超数排卵处理。采集的精子需要经过获能处理后，才具备受精能力。 (3)将目的基因导入动物细胞的常用方法是显微注射法。为获得某一性别的动物，在胚胎移植前需进行性别鉴定。胚胎分割技术可看作克隆，这体现了早期胚胎细胞的全能性。 (4)目的基因成功表达的标志是检测到相应的目的基因控制合成的产物。 专题3　 胚胎工程 2014年(6考)：新课标全国卷ⅠT40，福建T33，江苏T2、T19、T28，山东T36 2013年(3考)：新课标全国卷ⅠT40，山东T35，江苏T13 2012年(3考)：山东T35，江苏T9，浙江T2 三年 考题 1.动物胚胎发育的基本过程与胚胎工程的理论基础　 Ⅰ 2.胚胎干细胞的移植　 Ⅰ 3.胚胎工程的应用　 Ⅱ 三年12