湖北省高级中学高中生物《12 基因工程的基本操作程序》导学案 新人教版选修3.docVIP

专题一 基因工程 1.2基因工程的基本操作程序 【学习目标】1．理解基因工程的原理 2．简述基因工程基本步骤的几个步骤 【学习重点】基因工程的基本操作步骤 【基础回扣】 转录：场所：_________________模板：_________________原料：_______________________ 酶： 原则： 结果：_______________________ 翻译：场所：_________________模板：_________________原料：_______________________ 酶： 原则： 结果：_______________________ 氨基酸有_________种，决定氨基酸的密码子共有_________种， 一种tRNA只能携带___种氨基酸,一种氨基酸可以由______种tRNA携带。mRNA ……U－U－A－G－A－U－A－C－U ……这mRNA上有密码子________个，与其相应的反密码子为_______________________________________。 3、DNA复制： 场所：_________________模板：_________________原料：_______________________ 酶： 原则： 结果：_______________________ 默写出中心法则： 【预习导学】 一、目的基因的获取 1、目的基因：符合人们需要的，编码蛋白质的 。 2、获取目的基因的方法 （1）从基因文库中获取目的基因 ①基因文库：将含有某种生物不同基因的许多_________，导入受体菌的群体中______，各个受体菌分别含有这种生物的不同基因，称为基因文库。 基因组文库：含有一种生物的_______基因 ②种类 cDNA文库：含有一种生物的 ____基因（cDNA是反转录获得的双链DNA） ③目的基因的获取 根据基因的有关信息：基因的___________序列、基因在___________上的位置、基因的_________产物mRNA、基因的_________产物蛋白质等特性获取目的基因。 （2）利用PCR技术扩增目的基因。 ①PCR：是一项在生物体外________特定DNA片段的核酸合成技术。 ②条件：已知目的基因的_____________序列。 ③过程：第一步：加热至90～95℃ DNA解链为 ；第二步：冷却到55～60℃， 与两条单链DNA结合；第三步：加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶从引物起始进行 的合成。 ④方式：指数扩增=2n(n为扩增循环的次数) （3）人工合成法：基因较小，核苷酸序列已知，可以人工合成。 二、 基因表达载体的构建 1、表达载体的组成：目的基因+____________ +____________ +标记基因等。 2．启动子：位于基因的________，它是RNA聚合酶_________和结合的部位，驱动基因转录产生mRNA。 3、终止子：位于基因的尾瑞，终止___________ 。 4、表达载体的功能：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且__________给下一代；使目的基因______________和发挥作用。 5、标记基因：________受体细胞是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞 出来。 6、不同的受体细胞及目的基因导入受体细胞的方法不同，基因表达载体的构建上也会有所差别。构建方法：同种限制酶分别切割 和 ，再用 把两者连接。 将目的基因导入受体细胞： （一）转化：目的基因进人受体细胞内，并在受体细胞内维持稳定和_________的过程。 （二）方法 1、将目的基因导入植物细胞 （1）农杆菌转化法 ①农杆菌特点：易感染________植物和裸子植物，对_________植物没有感染力；Ti质粒的_________可转移至受体细胞，并整合到受体细胞的染色体上。 ②转化：目的基因插入Ti质粒的____________农杆菌→导入植物细胞→目的基因整合到植物细胞染色体上→目的基因的遗传特性得以稳定维持和表