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同种异体骨软骨移植与软骨修复(Ostochondral allograft and cartilage repair) 亓建洪 泰山医学院 运动医学与康复学院 运动医学研究所 附属医院骨科 2014.11.9 内容 一、关节软骨损伤的病理生理学 二、异体软骨移植临床应用相关问题; 骨软骨移植物的保存研究 ; 适应症与禁忌症; 技术要点; 临床效果; 免疫源性研究; 疾病传播 ; 三、评价 四、展望 一、关节软骨损伤修复的必要性 特点: 无血管 无淋巴 无神经 组织结构 软骨基质 胶原纤维 蛋白多糖 水 软骨细胞; 软骨表层带:Superficial Zone 软骨过渡带: Transitional Zone 软骨深层带: Radial Zone 软骨钙化层带:Calcified Cartilage Zone 软骨损伤的自软修复能力 表层损伤:软骨细胞反应性增殖或滑膜细胞修复关节软。 损伤达中间层、深层、钙化层:难以修复。继发创伤性关节炎或骨性关节炎。 损伤达软骨下骨与骨髓:可经肉芽组织化生纤维软骨。 全层缺损 全层软骨缺损的临床修复方法 骨髓刺激术 微骨折 钻孔 骨膜移植 自体软骨细胞移植 骨软骨移植 自体移植 同种异体移植 人工材料 人工关节表面置换(取代治疗) 生物材料 骨髓刺激 I型纤维软骨修复 3-5 年随访75% 改善 没有II型纤维软骨 不能阻止远期退行性关节炎的发生 自体骨软骨移植 自体软骨细胞移植(ACI) 透明样软骨 2 期手术 细胞花费高 第三代MACI技术(引自301医院于长隆教授幻灯片) 同种异体骨软骨移植 优点: 避免供体部位新创伤 ; 以透明关节软骨修复; 移植物来源充足,充分术前准备; 临床效果好; 缺点: 排斥反应; 疾病传播; 移植物费用。 二、异体软骨移植临床应用存在的问题 1、骨软骨移植物的保存 2、免疫源性研究 3、适应症与禁忌症 4、技术要点 5、临床效果 6、疾病传播 1、骨软骨移植物的保存方法 保存目的: 为患者移植手术赢得充分的时间: 移植物传染性疾病的监测; 移植物的包装与运输; 手术前准备; 保持关节软骨移植物的活性; 降低移植物免疫原性,降低免疫排斥发生率; 骨软骨移植物保存方法: 冷冻保存; 液体保存; 组织培养保存; 冷冻保存方法研究 冷冻保存的关键点: 低温保存的损伤机制 低温保护剂 降温方法 复温 细胞的损伤机制 1、“溶剂效应” :在降温过程中,细胞外冰晶形成和高渗使细胞出现固缩,如果细胞容积固缩到正常容积的55%,将导致细胞膜的泄漏,细胞外的液体进入到细胞内。 2、细胞内冰晶形成:细胞内冰晶形成产生的溶剂效应导致细胞器膜的损伤,此外,细胞内冰晶还对细胞内容物造成直接的物理损伤。提示细胞死亡。 冷冻造成软骨细胞损伤 低温保护剂 低温保护剂主要有: 非渗透性低温保护剂:PVP(聚乙烯吡咯),葡萄糖右旋糖苷,HES(羟基乙烯淀粉胶)等。使细胞脱水,从而减少对冻伤的敏感性。 效果不理想。 渗透性低温保护剂:二甲亚砜(DMSO),甘油,丙二醇等。能够减少细胞内外冰晶的形成,延缓溶剂浓度的升高速率,从而对组织起到保护性作用。 效果好。 降温方法 连续降温法 梯度降温法 玻璃化法 液态曲线法 各种冷冻保存方法的比较 自2005年至今,我们利用猪和人的膝关节软骨移植物的冷冻保存方法(梯度降温法,连续降温法,玻璃化法,液氮法)对软骨细胞成活率及其基质代谢的影响进行了研究。 各组软骨细胞存活率比较 各组软骨细胞活性(OD值)比较(MTT法) 我们的研究结果: 液体保存 新鲜标本放置于林格氏液中,可保存1周。 新型液体保存液的研究:可达到3-4周,软骨细胞存活率达到 83.6%。 我们实验液体保存8周,细胞存活率76%。 液体保存优于冷冻保存。 组织培养和冷冻保存细胞存活率比较 2、免疫原性研究 实验研究和临床观察也证实异体软骨移植通常不引起较为剧烈的免疫反应。 新鲜同种异体骨软骨移植长期随访发现,部分患者因时间延长而出现移植物吸收现象,可能与免疫排斥反应有关。 3)适应症与禁忌症: 适应症: 需要移植修复的局限性软骨全层缺损面积2.0 cm2(包括:由创伤引起的骨软骨缺损、缺血性骨坏死、剥脱性骨软骨炎以及关节腔内胫骨平台骨折) 其他软骨修复方法失败的补救方法。 4)移植技术要点 切开移植: 壳状移植法; 鹅卵石压配移植法; 关节镜下移植: 鹅卵石压配移植法 技术要点: 移植物曲率半径与受体匹配; 垂直取材; 移植物不搞出受区1毫米。 5、临床效果 国外文献报道,新鲜骨软骨移植多见,以切开手术居多。 少数近期报道关镜下镶嵌式异体骨软骨移植,临床优良率60-95%。 6、疾病传播 捐献者病
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