人教版本生物选修一课题1（DNA的粗提取与鉴定）课件.pptVIP

五、课堂小结 １、提取ＤＮＡ分子的基本思路 ２、提取ＤＮＡ分子的基本原理 ３、ＤＮＡ分子的鉴定方法 ４、实验设计与分析 实验探究： 　　 　　设计实验进行ＤＮＡ的粗提取和鉴定。 　　 　　要求：以植物细胞为实验材料，对比鸡血细胞中ＤＮＡ的粗提取与鉴定，比较动物细胞和植物细胞在实验设计中的不同点。 （注意：重点分析在细胞破碎方面的差别。） * 基因库 进化实质 基因频率 基因型比例 纯合子 性状 表现型 基因型 杂合子 基因 类型 概念 叶绿体 线粒体 染色体 DNA 显性基因和陷性基因 质基因 等位基因和非等位基因 核基因 基因结构 双螺旋结构 基本单位 空间结构 化学结构 DNA结构 三个特性 三个特点 脱氧核苷酸 编码区 非编码区 非编码区 真核细胞基因 原核细胞基因 内部结构 编码区 内含子 外显子 基因功能 表达功能 传递功能 贮存功能 复制 场所 模板 原料 产物 过程 特点 转录 场所 模板 原料 产物 过程 意义 翻译 场所 模板 原料 产物 过程 意义 中心法则 位置变化 突变功能 基因分离 基因突变 诱变育种 杂交育种 自由组合 基因交换 基因重组 概念 特点 类型 意义 一个概念 基因工程 五面应用 四个步骤 三种工具 二个原理 人类基因组计划 遗传病 染色体异常遗传病 单基因遗传病 多基因遗传病 基因 半保留复制 出现差错 准确无误 遗传　　　变异 （传递信息） 质基因 核基因 细胞质遗传 DNA 双螺旋 空间结构 特点 稳定性 多样性 特异性 转录、翻译 酶、激素　结构蛋白 调控细胞代谢　决定细胞结构 （表达信息） 显性基因 隐性基因 基因型 纯合子 杂合子 表现型 控制 等位基因 非等位基因 相对性状 控制 显性性状 隐性性状 遗传规律 基因分离 自由组合 伴性遗传 细胞核遗传 变异规律 遗传 进化的内因 小的变异 基因突变 基因重组 染色体变异 新基因 新基因型 可遗传变异 生存斗争（动力） 适者生存 大的 变异 新物种 三个环节 育种（方法） 人类遗传病 课题1 DNA的粗提取与鉴定 专题五 DNA和蛋白质技术 一、提取DNA分子的基本思路 利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异，提取DNA，去除其他成分。 二、提取DNA分子的基本原理 原理１:利用ＤＮＡ分子的溶解性 原理２:利用ＤＮＡ分子的耐受性 １、DNA的溶解性 　　①DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同。 　　②DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的蛋白质则可以溶于酒精。利用这一原理，可以将DNA与蛋白质进一步分离。 ２、DNA分子的耐受性 ①蛋白酶能水解蛋白质，但是对DNA没有影响； ②大多数蛋白质不能忍受60－80°C的高温，而DNA在80°C以上才会变性； ③洗涤剂可以溶解细胞的细胞膜，去除脂质和蛋白质,但对DNA没有影响。 三、DNA分子的鉴定 　　DNA与二苯胺（沸水浴５min）会染成蓝色，因此，二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。(注意：二苯胺在使用时再配制。) 四、实验设计的注意事项 （一）实验材料的选取 （二）破碎细胞，获取含DNA的滤液 （三）去除滤液中的杂质 （四）DNA的析出与鉴定 （一）实验材料的选取 　　　　　　　鱼卵、猪肝、菜花、香蕉、鸡血、猕猴桃、洋葱、豌豆、菠菜、在液体培养基中培养的大肠杆菌。 　　　　　　　凡是含有DNA的生物材料都可以考虑，但选用DNA含量相对较高的，以及提取比较容易的生物组织，成功的可能性更大。 １、原则： ２、材料： （二）破碎细胞，获取含DNA的滤液 1、动物细胞 2、植物细胞 　　动物细胞的破碎较易，例如，在鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水 ，同时用玻璃棒搅拌，过滤后收集滤液即可。 　　植物细胞需要先用一定的洗涤剂和食盐溶解细胞膜。洗涤剂是一些离子去污剂，能溶解细胞膜，有利于DNA的释放；食盐的主要成分是NaCl，有利于DNA的溶解。 （三）去除滤液中的杂质 　　为了纯化提取的DNA需要将滤液作进一步处理共三套方案（教材55页）： 方案一: 方案二: 方案三: ＤＮＡ的溶解性 ＤＮＡ不受蛋白酶的影响 ＤＮＡ的耐高温性比较强 （四） DNA的析出与鉴定 　　DNA的析出用的是与滤液体积相等的冷却的酒精溶液（体积分数为95％） ，静置2-3min，溶液中会出现白色丝状物，用玻璃棒沿一个方向搅拌，卷起丝状物，这就是粗提取DNA。 1、DNA的析出 2、DNA的鉴定 　　鉴定DNA时在试管中先加入浓度为2mol/L 的NaCl溶液5ml于两只试管中，其中一只加入DNA丝状物，各加入二苯胺试剂4ml。混合均匀后，将试管置于沸水中加热5min,待试管冷却后，比较两只试管中溶液颜色的变化，看看溶解有DN