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血管性认知障碍的载脂蛋白E基因多态性 　　[摘 要] 目的：分析血管性认知障碍的载脂蛋白E基因多态性，为临床诊断提供参考。方法：选取2010年8月～2013年2月我院收治的血管性认知障碍患者90例为研究对象，其中脑出血患者45例，脑梗死患者45例。使用基因特异性多重聚合酶链反应技术进行APOE基因多态性测定。结果：血管性认知障碍的患者以ε3/3基因最常见，但在脑出血、脑梗死中检出率无明显差异；脑出血患者ε2出现频率更高于脑梗死组，脑梗死患者ε4出现频率高于脑出血组，两组比较差异明显，P0.05。结论：血管性认知障碍的患者有APOE基因亚型改变，且以ε3/3基因最常见，推测在脑血管疾病患者中，携带有ε4患者更容易发生脑梗死倾向，而携带有ε2患者有更高脑出血倾向。 　　[关键词] 血管性认知障碍；APOE基因多态性 　　中图分类号：R 743 文献标识码： B 文章编号：2095-5200（2015）04-100-02 　　血管性认知障碍是一组由血管因素所导致的认知功能损伤，为临床引起认知障碍主要形式，且伴随执行控制功能损伤和记忆力降低[1]。血管性认知障碍包括多种脑血管病因，如大血管的病变、小血管的病变等[2]。流行病学调查研究显示，4%65岁以上老年人罹患有血管性认知障碍[3]。我们研究分析了APOE基因多态性在血管性认知障碍患者中情况，为早期诊断提供参考，报告如下。 　　1 资料与方法 　　1.1 一般资料 　　选取2010年8月～2013年2月我院收治脑出血、脑梗死导致血管性认知障碍患者90例为研究对象。所有患者均经MRI等影像学确诊。排除感染性疾病，意识障碍，失语，精神障碍等患者。45例脑出血患者中男性24例，女性21例，年龄54～77岁，平均（63.78±5.64）岁；45例脑梗死患者中男性25例，女性20例，年龄在56～76岁，平均（63.14±5.97）岁；两组患者一般资料比较，差异无统计学意义，具有可比性。 　　1.2 方法 　　两组患者均采集空腹肘静脉血EDTA-Na2抗凝。取500uL血液样本加入到离心管内，加入ERL Buffer，充分振荡离心管，使白细胞重悬，高速振荡促进细胞裂解，加入蛋白酶、RnaseA等，以洗脱DNA。随后将洗脱液加入结合柱中，置于离心管内，高速离心，以洗脱DNA。使用多重聚合酶链式反应方法（ARMS-PCR）对APOE基因多态性进行检查。根据电泳结果判定载脂蛋白E基因型。 　　1.3 数据处理 　　所有试验数据均使用SPSS19.0软件包处理，计数资料组间比较使用χ?检验。当P0.05时，表示实验样本差异明显且有统计学意义。 　　2 结果 　　血管性认知障碍患者以ε3/3基因最常见，但在脑出血、脑梗死两组中检出率无明显差异；脑出血患者ε2出现频率高于脑梗死组，脑梗死患者ε4出现频率高于脑出血组，两组比较差异明显，差异有统计学意义。详细结果见表1。 　　3 讨论 　　脑血管性认知障碍导致神经损伤包括大血管梗死、小血管梗死、脑出血、脑白质疏松、神经胶质增生等[4]。引起血管性认知障碍危险因素较多，包括人口学因素、血管性危险因素、遗传因素等，其中遗传因素、人口学因素为不可干预性因素[5]。在遗传因素中，目前临床研究较为明确的是Notch3基因，为CADASIL缺陷基因，此基因突变会导致血管平滑肌变形。 　　近年来临床学者研究提示载脂蛋白E（APOE）基因具有多态性，会加速动脉粥样硬化形成，增加脑血管疾病发病风险。载脂蛋白E为富含有精氨酸一种碱性蛋白质，是从血浆内分离出一种具有结合、转运脂质功能蛋白，其定位在19号染色体，由多个氨基酸残基组成，是单链多肽糖蛋白，分子量为34145D [6-8]。APOE作为一种功能性蛋白，其主要由肝细胞、巨噬细胞合成，其编码三种异构体，包括ε2、ε3、ε4三种等位基因。这主要是由于112位、159位半胱氨酸、精氨酸互换[9]。这种基因多态性，导致人群内有不同基因表型，如纯体ε2/2，ε3/3和ε4/4，杂合体中则有ε2/3、ε3/4、ε2/4。其中以ε3最为常见。而ε2、ε4目前被认为是突变型基因，对血脂、动脉硬化均有较大影响[10-13]。 　　APOE是神经系统代谢重要因子，且髓鞘磷脂代谢与神经元损伤修复也存在有明显关系。在发生缺血性疾病等导致神经病变、再生后，会导致APOE含量增加，并促进胆固醇酯化，以促进轴突膜生长[14-15]。而这种作用是ε3单体特异性，ε4并无此作用。本实验提示血管性认知障碍患者以ε3/3基因最常见，但在脑出血、脑梗死中检出率无明显差异，P0.05，差异无统计学意义；脑出血患者ε2出现频率更高于脑梗死组，脑梗死患者ε4出现频率高于脑出血组，两组比较差异明显，P0.05，差异有统计学意义。