【2017年整理】csq培养液中酵母菌种群数量的变化.doc

探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化 血球计数板 血球计数板是一种专门用于计算较大单细胞微生物的一种仪器。计数时，常采用 法，多次取平均值，计算出每mL的酵母菌细胞个数。 将经过适当稀释的菌悬液（或孢子悬液）放在血球计数板载玻片与盖玻片之间的计数室中，在显微镜下进行计数。由于计数室的容积是一定的（ 0．1mm2），所以可以根据在显微镜下观察到的微生物数目来换算成单位体积内的微生物总数目。由于此法计得的是活菌体和死菌体的总和，故又称为总菌计数法。 　　 计数室的刻度一般有两种规格，一种是一个大方格分成16个中方格，每个中方格又分成25个小方格；另一种是一个大方格分成25个中方格，每个中方格又分成16个小方格。但无论是哪种规格的计数板，每一个大方格中的小方格数都是相同的，即16×25=400小方格。 　　1mm，则每一大方格的面积为1mm2，盖上盖玻片后，载玻片与盖玻片之间的高度为0．1mm，所以计数室的容积为0．1mm3。 　　16或25，就得出一个大方格中的总菌数，然后再换算成1ml菌液中的总菌数。 下面以一个大方格有25个中方格的计数板为例进行计算：设五个中方格中总菌数为A，菌液稀释倍数为B，那么，一个大方格中的总菌数 　　 　 　　16个中方格的计数板，设五个中方格的总菌数为A＇，菌液稀释倍数为B＇则 　　　　　 实验原理 1．在含糖的液体培养基（培养液）中酵母菌繁殖很快，迅速形成一个封闭容器内的酵母菌种群，通过细胞计数可以测定封闭容器内的酵母菌种群随时间而发生的数量变化。 2．养分、空间、温度和有毒排泄物等是影响种群数量持续增长的限制因素。 3．酵母菌计数方法：抽样检测法。 先将盖玻片放在计数室上，用吸管吸取培养液，滴于盖玻片边缘，让培养液自行渗入。多余培养液用滤纸吸去。稍待片刻，待细菌细胞全部沉降到计数室底部，将计数板放在载物台的中央，计数一个小方格内的酵母菌数量，再以此为根据，估算试管中的酵母菌总数。注意：从试管中吸出培养液进行计数之前，要将试管轻轻震荡几次。 实验步骤 (1)10 mL无菌马铃薯培养液或肉汤培养液加入试管中。 (2)将酵母菌接种入试管中的培养液，先通过显微镜观察估算出10mL培养液中酵母菌的初始数量 (3)将试管放在25℃条件下培养。 (4)每天定时(5) 以_____为横坐标，为纵坐标，画出酵母菌的结果分析/天 1 2 3 4 5 6 … 平均数量/个 （1）酵母菌在培养液中开始呈__________增长，经过一段时间的增长后，数量趋于稳定，呈___________增长。 (3)影响酵母菌种群数量的因素可能有养料、温度、pH　空间及有害代谢废物等 探究思路??? 怎样进行酵母菌的计数。对一支试管中的培养液(可定为10ml)中的酵母菌逐个计数是非常困难的，可以采用抽样检测的方法：先将盖玻片放在计数室上，用吸管吸取培养液，滴于盖玻片边缘，让培养液自行渗入，多余培养液用滤纸吸去，稍待片刻，待酵母菌细胞全部沉降到计数室底部，将计数板放在载物台的中央，计数一个小方格内的酵母菌数量，再以此为根据，估算中的酵母菌总数盖玻片下，培养液厚度为0.1mm，可算出10ml培养液中酵母菌总数的公式：2.5×104x(x为小方格内酵母菌数)从试管中吸出培养液进行计数之前，应???②如果一个小方格内酵母菌过多，难以数清，应当？??? 摇匀试管取1mL酵母菌培养液稀释几倍后，再用血球计数板计数，所得数值乘以n×2.5×104，即为1mL酵母菌液中酵母菌个数。对于压在小方格界线上的酵母菌，应当怎样计数？本实验需要设置对照？如果需要,请讨论对照组应怎样设计和操作，如果不需要，请说明理由。不需要，本实验旨在探究培养液中酵母菌在一定条件下的种群数量变化，只要分组重复实验，获得平均数值即可。需要做重复实验吗？??? 不用重复，只要分组重复实验获得平均值即可。怎样记录结果？记录表怎样设计？(注：菌数×2.5×104个) 起始?1?2?3?4?5?6?7如果一个小方格内酵母菌过多，难以数清，应当采取怎样的措施？??? 摇匀试管取1mL酵母菌培养液稀释几倍后，再用血球计数板计数，所得数值乘以n×2.5×104，即为1mL酵母菌液中酵母菌个数。???对于压在小方格界线上的酵母菌，应当怎样计数？只计数相邻两边及其顶角的酵母菌数。分析：??? 1、根据实验数据可得到右图所示的增长曲线； (2)增长曲线的总趋势是先增加后降低，原因是在开始时，培养液中营养充足、空间充、裕、条件适宜，因此酵母菌大量繁殖，种群数量剧增；随着酵母菌数量的不断增多，营养消耗、PH变化等，使生存条件恶化。?? （三）实验评价??? 1、问题：用每个小组的记录数值所描种群数量的变