運动解剖学实验指导.docVIP

?运动解剖学实验指导 ? 实验一??? 细胞和组织的显微观察 一、实验目的 （一）正确使用显微镜。 （二）掌握细胞的基本形态结构，理解其形态。 ? （三）掌握上皮组织、结缔组织的结构特点，了解上皮组织的分布及功能特点，了解结缔组织的分类。 ? （四）掌握骨骼肌、肌原纤维的结构，掌握神经元的结构特点。 二、实验原理 利用显微镜观察不同的细胞与组织结构。 三、实验器材 ? 细胞结构模型、细胞组织切片、显微镜等。 四、实验步骤 （一）学习显微镜的一般构造（图3-1) 显微镜是进行细胞、组织研究和实验的重要 仪器之一。显微镜可分为普通光学显微镜和精密度很 高的电子显微镜。普通光学显微镜又可分为单目镜、 双目镜等多种类型。在实验课中，双目镜常用于示教， 学生实验多用单目镜。现重点介绍普通单目镜的一般 构造。 1．镜筒：镜筒装接目镜。 2．旋转盘：接于镜筒下方，嵌装物镜，可以旋转。 3．镜台：放置玻片的平台，中央有一圆孔，光线可通过此孔，两侧装有压片夹或推进器。 4．光圈：位于集光器上方，可任意开闭，以调节光线强弱。 5．集光器：由几片透镜组成，用以聚集光线，可上下移动，以调节光度。 6．副镜台调节器：转动时可使副镜台上下移动，以调节亮度。 7．反光镜：为集光器下方的圆镜，有平凹两面。凹面镜有聚光作用，光线弱时使用。平面镜只有反射作用，光线强时使用。此镜片可向各方向转动，收集光源。 8．目镜：嵌于镜筒之顶端，刻有5×或l0×或15×等字样，表示该目镜的放大倍数。 9．物镜：嵌于旋转盘下，分低倍、高倍和油镜3种，上面均刻有放大倍数，如l0×或40×或100×等。低倍镜放大约10倍，镜头较短。高倍镜放大约40倍，镜头较长。油镜放大约90~100倍，镜头最长，有红线或黑线作标记，用时在镜头与玻片之间要加香柏油。 10．镜臂：位于中部，呈弓形，作支持和握取用。 11．细调节器：位于粗调节器下方，调节轮较小，旋一圈可升降镜筒0. lmm。 12．粗调节器：位于镜筒两侧，调节轮较大，旋一圈可升降镜筒10mm。 13．镜座：在最下部，呈马蹄形，作支撑用。 ??? （二）显微镜的使用方法 ?? ?1．对光 ??? 转动旋转盘，使低倍镜置于镜筒直下方，放大光圈，适当下降集光器，两眼睁开，用左眼在目镜上观察（注意两眼睁开，勿用右眼），转动反光镜，使镜内视野完全明亮为止。 ??? 2．装片 ??? 用粗调节器升高镜筒，将切片平置于镜台上（盖玻片必须朝上）；移动切片使需观察的部分移至圆孔中央，并用压片夹固定（如有推进器时，可先将切片固定，再将标本移至圆孔中央）。 ??? 3．使用低倍镜 ??? 向前转动粗调节器，应从镜侧密切注视，使镜筒慢慢下降至距离玻片约3mm时为止。然后，左眼注视目镜，向后转动粗调节器，使镜筒缓慢上升至见到物象。再转动细调节器，将物象调节到最清晰时为止。 ??? 用低倍镜观察视野广，能看见较多结构，宜多下功夫观察和寻找组织结构，不要急于使用高倍镜。 ??? 4．使用高倍镜 ??? 在低倍镜下将需观察的结构移至视野中央，再把高倍镜转至镜筒直下方，通常只需转动细调节器调节焦距即可得到清晰的物象，如光线太弱，可开大光圈，升高集光器。在使用非原配镜头的显微镜时，则应先用粗调节器升高镜筒，再调换高倍镜，按使用低倍镜的步骤进行。 ??? 5．使用油镜 ??? 在使用油镜之前需将油镜头和玻片用二甲苯或1：1乙醚纯酒精拭净，将高倍镜下已找到的结构，移至视野中央。接着，将镜头升高约1cm，将油镜头转至镜筒直下方，滴香柏油一滴于切片上欲观察处（注意滴油时切勿产生气泡）。从侧面注视镜头使之慢降至镜头浸入油滴，约与玻片相隔0. 5mm，然后用左眼注视目镜，转动细调节器使物象至最清晰为止。 使用油镜时，需要更强的光线，用后须用擦镜纸擦净镜头和玻片上的油迹，再用1：1乙醚纯酒精拭净。 （三）观察细胞类型、细胞的形态结构 取细胞模型，观察细胞膜、细胞质和细胞核3部分，辨认细胞质的细胞器，分别观察它们的形态结构，思考它们的功能。 （四）观察四种组织的结构特点 1．取各类上皮组织切片，观察各类上皮组织的结构。 2．取疏松结缔组织与致密结缔组织切片，用显微镜观察其结构特点，取软骨组织与骨组织切片，用低倍镜观察，可见哈佛氏管、哈佛氏骨板和间骨板；内、外环骨板由于制片时不能同时保留故不能清晰辨出。用高倍镜观察，可见骨板间有许多呈黑色的卵圆形小腔，即骨陷窝，四周的黑色小支，即骨小管，还可见相邻骨陷窝之间的骨小管彼此相通。 3．取骨骼肌纵切片与横断面切片，用低倍镜和油镜切片或幻灯片观察，Z线、H带、I带、肌节等，观察骨骼肌细胞的结构特点。 4．取脊髓灰质涂片，可见胞体与胞突(轴突与树突)，选择一较清晰的神经元，用低倍镜或高倍镜观察神经细胞质内尼氏体、核仁。 五、注意事项 （