【2017年整理】医学免疫学实验教案.docVIP

《医学免疫学》课程实验教案 实 验 一 实验名称：E-玫瑰花环形成实验 计划学时：4 学时 实验目的与要求：1.掌握人T淋巴细胞形成E-花环的实验原理和操作方法。 2.熟悉T淋巴细胞的功能检测方法。 实验仪器、试剂：淋巴细胞分层液（Ficou）、1%绵羊红细胞、肝素抗凝人血、无钙镁Hanks液、水平离心机、0.8%戊二醛、37℃水浴箱、显微镜、其他。 实验对象：实验同学 实验原理：体外测定人外周血中T淋巴细胞数量的方法有多种,以玫瑰花环试验最为简易常用，T淋巴细胞数量的变化与机体的细胞免疫功能状态有一定关系。人周围血液中T淋巴细胞表面有绵羊红细胞受体，与绵羊红细胞相遇时，在其周围形成花环样细胞团，凡能结合三个以上绵羊红细胞者称为E攻瑰花环形成细胞。正常人的花环形成率为50~70%，大致可以代表周围血中T细胞的百分数。临床上多用于某些疾病的诊断及疗效的观察。 操作方法： 1、取肝素抗凝血1~2ml，用分层液分出淋巴细胞并洗涤，用Hanks液调整细胞浓度为2—2.5×106ml。 2、取小试管加入l ml淋巴细胞悬液及1%羊红细胞0.l ml，混匀置37℃水浴箱5分钟。 3、800～1000 r/min低速离心5分钟，放4℃冰箱2小时。 4、轻轻旋转试管使团块混匀，加2滴0.8