关节损伤再灌注-改后概述.ppt

肢体IR后关节软骨表面扫描电镜观察 D图：IR后3月，软骨表面出现的裂隙，胶原纤维暴露，表面不平坦。（×1000） 关节软骨内MMP3的表达与分布 肢体IR后1天组，关节软骨内阳性颗粒较少 ， 主要分布在胞浆内；3天组明显增多，阳性颗粒在胞浆和基质中均有分布； 至1周和2周组渐升高达峰值 ， 之后表达逐渐回落，但8周-12周组仍高于对照侧。 组化SP法检测IR后关节软骨内MMP3的表达 A图：对照侧关节软骨胞外基质很少着色，阳性细胞少，染色淡。 （DAB染色 × 200） 组化SP法检测IR后关节软骨内MMP3的表达 B图：IR后1天，关节软骨内出现较少阳性细胞， 阳性染色主要在细胞内。 （DAB染色×400） 组化SP法检测IR后关节软骨内MMP3的表达 C图：IR后3天，阳性细胞增多，主要集中在表层，胞外基质有着色。（DAB染色×400） 组化SP法检测IR后关节软骨内MMP3的表达 D图：IR后1周，大量染色阳性细胞，胞外基质同时着色。 （DAB染色×400） 组化SP法检测IR后关节软骨内MMP3表达 E图：IR后2周，阳性细胞多，着色深。 （ DAB染色×400） 组化SP法检测IR后关节软骨内MMP3表达 F图：IR后4周，在大量阳性细胞周围，可见基质的阳性染色。（DAB染色×400） 组化SP法检测IR后关节软骨内MMP3表达 G图：IR后8周，表层细胞有脱落，柱状层染色阳性细胞多。 （DAB染色×400） 组化SP法检测IR后关节软骨内MMP3表达 H图：IR后12周，表层细胞脱落严重，细胞数目减少，但仍见强染色细胞。 （DAB染色×400） 关节内MMP3的合成较正常增多，并在关节内广泛分布，与关节软骨基质的降解有关。刺激 MMP3 表达的因素，考虑可能是肢体缺血再灌注后释放大量的自由基和炎症细胞因子，如：一氧化氮（NO）、白介素-1（IL-1）肿瘤坏死因子（TNF）等。有研究证明这些因子可刺激关节软骨细胞和滑膜细胞产生和分泌金属蛋白酶类。 后期出现新生软骨细胞，而慢性关节炎形成，炎性介质及细胞因子刺激新生软骨细胞合成 MMP3 ，MMP3mRNA又表现出增高趋势。而在2周-4周时MMP3并不随 mRNA而变化，可能是细胞裂解将胞内合成的MMP3释放的缘故。 关节软骨内蛋白多糖含量变化 IR侧1天、3天组与对照侧无明显差异；1周染色较对照侧淡；2周组蛋白多糖含量较1天组明显减少（P0.01）；直到12周组实验侧蛋白多糖含量较对照侧存在明显差异。 免疫组化SP法对关节软骨内蛋白多糖染色 A图：对照侧软骨内着色深，基质与胞内均有着色。 （DAB染色×100) 免疫组化SP法对关节软骨内蛋白多糖染色 B图：IR后1周，软骨内蛋白多糖染色仍较深。 （DAB染色×100) 免疫组化SP法对关节软骨内蛋白多糖染色 C图：IR后1月，染色明显变淡，胞内着色少。 （DAB染色×100) 免疫组化SP法对关节软骨内蛋白多糖染色 D图：IR后3月，染色淡，与对照侧有差异。 （DAB染色×100) IR侧关节软骨内 蛋白多糖含量减少可能的原因 IR后由于软骨细胞的损伤，细胞合成蛋白多糖及胶原的功能下降，而此时MMP3表达还没达到最高峰，因此推断软骨细胞损伤是IR早期软骨内蛋 白多糖含量减少的主要原因。2 周后MMP3在关节软骨内表达增多，基质中也有大量表达，明显多于对侧。金属蛋白酶合成与分泌，引起蛋白多糖的降解，最终导致蛋白多糖含量下降。 三、预 防 预防重于治疗，因而要先于治疗。 1、肢体不论何种原因造成的缺血，时限不应超过6－8小时，最长不超过10－12小时。过长即可造成不可逆性损伤。因此，必须争分夺秒尽快采取措施恢复血供。 2、部队指战员操练、施工尽量不要一个姿势过长时间的操作，可以变换姿势或适当休息后，再行操练。避免肢体长时间寒冷，注意保温。 3、一旦发现肢体有血供不足或缺血的早期症状，如肢体行动乏力、酸痛或不稳等，应尽早采用活血化瘀、改善血液循环的药物治疗。 4、适当的补充微量元素，如锌、铁、硒等，是预防的重要方面。 5、维生素、钙的适当补充亦是预防和治疗所必须的措施。 四、消灵仙注射液与Vit.E注射 液对关节缺血再灌注损伤的防治研究 鉴于以上实验结果，研究I/R I 损伤的防治方法。我们采用中药