人参皂苷联合骨髓间充质干细胞移植对大鼠阿尔茨海默病模型学习记忆能力及神经元再生影响.docVIP

中国医科大学 硕士学位论文 人参皂苷联合骨髓间充质干细胞移植对大鼠阿尔茨海默病模型 学习记忆能力及神经元再生的影响 姓名：张艳 申请学位级别：硕士 专业：神经病学 指导教师：曹云鹏 201109  ·中文论著摘要· 殖，自体移植又避免了神经干细胞移植的免疫排斥反应，骨髓问充质干细胞在体 内外都可向神经系统分化，弥补了神经干细胞来源困难的问题，因而骨髓问充质 干细胞作为神经细胞的另一来源，用于中枢神经系统疾病及其损伤修复的细胞学 治疗，具有更广阔的应用前景，并成为生命科学的一个新的研究热点。 再生的保护作用。 后阿尔茨海默病模型大鼠的学习记忆能力，通过免疫组化方法观察移植后神经元  ?榇笫蠊撬栉食渲矢上赴?浦睬昂笱?凹且淠芰μ岣撸?窬?T偕?? 关键词 骨髓问充质干细胞人参皂苷阿尔茨海默病 ?  英文论著摘要 ’ ??? ??? ? ???? ?????? ? ? ?? ??????????? ???．????珹? ??????? ????? ? ???? ?????瓻???????? ? ? ??????? ??? ???? ??—?? ????? ????????????????珺?? ?? ? ??琩??? ???瓵???????? ??? ??? ??? ?? ? ? ? ?? ??? ? ?? ??????? ??? ??? ????? ? ? ??? ??? ??? ??疭???? ??? ? ????? ?  ? ?? ?? ?? ? ?????甌?? ?????? ??? ???? ? ??????? ???? ?????? ??? ??? ?????? ?? ??? ?? ?????，?????? ??? ?? ??? ?????疭 ?  ·论文· ????珹?是老年人中最常见的神经系统退变 性疾病，是引起老年性痴呆的主要原因。国内流行病学调查显示其发病率随着年 神经细胞，因而对中晚期?患者的疗效有限并不能真正治愈晚期患者。因此， 寻找能够改善患者中、晚期症状治疗方法已迫在眉睫。 ????，???移植治疗?是近 少。为研究???囊浦捕杂谥瘟评夏晷猿沾舻囊庖澹?臼笛槟庥τ肁??．? 疗的效果。  设计：随机对照动物实验 实验动物：健康雄性?大鼠，购自中国医科大学实验动物中心，实验过程中 对动物的处置符合中华人民共和国科学技术部??年颁布的《关于善待实验动物 的指导性意见》标准。 微镜、立体定位仪?毡竟獾绻??、迷宫箱 司?????分离液、胰蛋白酶、???????从眯褪约梁小??底物显色试 ?％水合氯醛???痥?骨蛔⑸渎樽恚??軵???和???的大鼠脑立体定位图 ?  接种于培养瓶中，在含?％胎牛血清的??培养液中对其进行纯化，扩增和传 下图为长满培养瓶的骨髓间充质干细胞 ?  ?樵贏组基础上给予腹腔注射人参皂苷????痥?，每天?危??个 月， ?椴捎肁组相同的方式注射?豯生理盐水 流水冲洗?小时，然后进行包埋、切片 ???旧ǎ呵衅?９娌捎枚?妆酵牙???骷兑掖贾了?颍憾?妆????一 ??一蒸馏水洗??。??％苏木精?℃染????％盐酸酒精分色，蒸馏水沈， 化物酶溶液?约罝???确跤???，??????＜?????新鲜配制 的??芤海?谙晕⒕迪鹿鄄欤?刂品从κ奔洌?浞炙?矗?兄瓜陨ā???苏 木精染核，酒精脱水，二甲苯透明，中性树胶封片。应用彩色病理图像分析系统 对切片进行图像分析。所有的切片均在同一光强度下，同一放大倍数下进行，每 张切片选取???×镜下视野，计数阳性细胞数，以单个标本为单位，取平均值。 ?  小，胞核固缩，胞浆浓缩、深染???? ?  ·．．～． ：．· ’。．．． ．，：：。??二??甹：：?．??篲．：宝：??籪??躀：。．’?簀?海???＃簀?： ．■ · ． ’ ． 。 ’． 图???联合治疗组阿尔茨海默病大鼠海马锥体细胞排列较整齐、均匀，结构清晰， ?  ≯：·多??、，≥：一，“，?一 ，，．‘· 。 ? 图???  萋 争 § ? ≤ ￡ ?■￡瓣 重  近年来，通过组织工程技术体外分离和培养所需的靶细胞用于神经退行性疾 病的细胞治疗提供了新的途径，受到学者们的广泛关注和重视。中枢神经系统变 性的神经组织不能自然恢复，而成体内存在的内源性神经干细胞虽能启动白发修 复反应，但数量极有限，因此，体外诱导多能干细胞分化为目的细胞，进行细胞 移植以修复受损的神经组织，一直是干细胞研究的热点。目前用于中枢神经组织 移植的细胞主要有胚胎干细胞、神经于细胞和??充质干细胞。供体细胞应具备： ①容易获取②体外培养能迅速增殖③具有免疫耐受性或免疫无反应性④能长期存 活并能与宿主脑内结构相整