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【2017年整理】庆大霉素生产工艺
硫酸庆大霉素生产工艺流程
班级08药剂 姓名汪骏 学硫酸庆大霉素工业发酵的总流程图
孢子悬浮液的制备流程及工艺要求
设备:
蒸汽灭菌柜 双人净化工作台
操作步骤
1.分装纯化水至三角瓶,每瓶装150mL左右。
2.组装接种瓶及接种皮管,组装严密,包扎结实。
3.以上器材及接种用具灭菌,125±1゜C,60min。
4.在缓冲间穿好无菌衣,戴上无菌口罩,进入洁净室,符合人流﹑物流进出程序。
5.用酒精棉球擦拭超净台面﹑双手,先擦台面,后擦手。
6.开启超净台通风,观察风速是否正常,将接种瓶、皮管、无菌水、接种铲及斜面摆在洁净台上。
7.将灭菌纯化水倒入茄子瓶中,一瓶纯化水倒两只茄子瓶。
8.用接种铲将孢子刮下制成孢子悬浮液,用力适度,勿刮出培养基碎屑。
9.打开接种瓶瓶口,将孢子悬浮液全部倒入接种瓶中,注意不要倒在瓶口处,然后重新组装好接种瓶及接种皮管。
10. 制备完毕关闭洁净台,出洁净室,符合人流、物流进出程序。
物料指标
物料编号
物料名称
投产数量
0601013
纯化水
150-200ml
---
子斜面孢子
4支
一级种子发酵培养
实际培养参数控制
培养参数控制
培养时间
罐温
罐压
空气压力
空气流量
搅拌时间
48小时左右
37度
0.06MPa
0.1MPa
30m*3/h
--
镜检
镜检步骤
1.取样 打开蒸汽阀先灭菌,然后关蒸汽阀,打开取样阀取样。取样完毕后关阀,再次打开蒸汽阀灭菌,关闭。
2 用载玻片沾取一薄层发酵液,加热以使发酵液固定在载玻片上,然后滴加美兰溶液进行染色,在显微镜下观察目的菌的菌丝形态。
3.配制酚红肉汤培养基,在培养基中加入发酵液在恒温箱中进行培养。一定条件下观察培养基颜色的变化来判断是否染菌。
4.另取样用粘度计测粘度。
一级种子镜检
1.正常标准
菌丝形态:实团,网团,边散,伸展,原生质充足。
无菌度: 正常,即无杂菌污染。
3.实例 批一级种子镜检生长指标
生长时间
菌丝形态
菌丝数量
杂菌情况
22h
小网、分支短
量少
正常
30h
网团、实团
量一般
正常
38h
网团、较伸展
量较多
正常
46h
实团、边散
量多
正常
51h
实团、伸展
量多
正常
二级种子的培养
进料状况
表4 二级种子培养进料状况
物料编号
物料名称
投料量
生产单位
批号
0101009
淀粉
150Kg
卫辉玉兰公司
0609014
0101006
玉米粉
40 Kg
自制
0907001
0101007
豆饼粉
100 Kg
自制
0907009
0101003
蛋白胨
25 Kg
滑云东升公司
0906013
0101002
硫酸铵
4 Kg
中石化岳阳公司
0906004
0101004
硝酸钾
0.4 Kg
交城晋盛公司
0903002
0101001
轻质碳酸钙
25 Kg
焦作兰冠耀公司
0905003
0103272
氯化钴
30 g
上海先金公司
090309
0101016
泡敌
0.6L
开封树脂厂
0905013
0601007
饮用水
3.2t
二级种子镜检
1.正常标准
菌丝形态:网团,边散,伸展,连片、原生质充足。
无菌度: 正常,即无杂菌污染。
2.实例 批号表5 二级种子镜检生产指标
生长时间
菌丝形态
菌丝数量
杂菌情况
4h
散网、连片
量多
正常
8h
大网片、伸展
量多
正常
12h
大网片、伸展
量多
正常
16h
大网片、伸展
量多
正常
实际培养参数控制
表6 二级培养参数控制指标
培养时间
罐温
罐压
空气压力
空气流量
搅拌时间
24小时左右
37度
0.03MPa
0.7MPa
170m*3/h
--
三级种子发酵
进料状况
表7 三级种子培养进料状况
物料编号
物料名称
投料量
生产单位
批号
0101009
淀粉
550Kg
卫辉玉兰公司
0609004
0101006
玉米粉
120Kg
自制
0907001
0101007
豆饼粉
360Kg
自制
0907009
0101003
蛋白胨
60Kg
滑云东升公司
0906013
0101002
硫酸铵
10Kg
中石化岳阳公司
0906004
0101004
硝酸钾
1 Kg
交城晋盛公司
0903002
0101001
轻质碳酸钙
75Kg
焦作兰冠耀公司
0905003
0103272
氯化钴
120 g
上海先金公司
090309
0102034
淀粉酶
150g
北京东升公司
0904003
0101016
泡敌
3L
开封树脂厂
0905013
三级种子镜检
1. 正常标准
菌丝形态:散网、伸展,连片、量多。
无菌度: 正常,即无杂菌污染。
2.实例 批号 301/327
表
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