亲和纯化技术[精选].pptVIP

亲和色谱定义 亲和色谱是利用亲和吸附作用分离纯化生物物质的液相色谱法。 亲和色谱所用的固定相为键合亲和配基的亲和吸附介质（亲和吸附剂） 亲和色谱原理 亲和色谱操作与一般的固定床吸附操作方式相似，多采用断通式前端分析法，分为进料、杂质清洗、目标产物洗脱合层析柱再生四步。 亲和色谱原理 料液进料（feedstock loading） 含有目标产物的料液连续通入色谱柱，直至目标产物在色谱柱出口穿透 杂质清洗(contaminant washing) 利用与溶解原料的溶液组成相同的缓冲液为清洗液，清洗色谱柱除去不被吸附的杂质； 产物洗脱(target product elution) 利用可使目标产物与配基解离的溶液洗脱目标产物 柱再生（column regeneration) 利用清洗液清洗再生色谱柱 亲和配基－酶、抗体和蛋白 酶的抑制剂 蛋白酶均存在抑制其活性的物质，称为酶的抑制剂。它的分布很广，有天然的生物大分子，如胰蛋白酶抑制剂（结合常数为109 L/mol），也有小分子化合物如氨基苄脒（结合常数为4×104 L/mol）。 抗体 抗体和抗原之间具有高度特异性结合能力，结合常数在107 ~1012 L/mol 蛋白A（或称A蛋白） A蛋白为分子量42 kDa的蛋白质，存在于金黄色葡萄球菌的细胞壁中。它与动物免疫球蛋白G（