Chapter2发酵液的预处理与固液分离要点.ppt

生物分离工程Bioseparation 第二讲 发酵液的预处理与固液分离 通过本章学习应掌握的内容 概述 发酵液的预处理 固液分离工程及常用设备 一、概述 微生物或动植物细胞在合适的培养基，pＨ值，温度和通气搅拌（或厌气）等发酵条件下进行生长和合成生物活性物质—目标产品； 培养（发酵）液中包含了菌（细胞）体，胞内外代谢产物，胞内的细胞物质及剩余的培养基残分等； 只有将固，液分离开，才能从澄清的滤液中采用物理、化学的方法提取代谢产物，或从细胞出发进行破碎、碎片分离和提取胞内产物。 二、发酵液的预处理 1、微生物发酵液特性 2、发酵液预处理的目的 3、发酵液预处理方法 1、微生物发酵液的特性 发酵产物浓度较低，处理体积量大； 各类细胞的颗粒小，相对密度与液相相差不大； 细胞等固型物含水量大，可压缩性大； 液相粘度大，大多为非牛顿型流体； 产品生物活性不稳定； 工业技术中典型的固体粒子 微生物发酵液的成分极为复杂，其中对后道纯化精制过程影响最大的是高价无机离子和杂蛋白质等，在预处理时，应尽量除去这些物质。 。 由于所需的产品在培养液和菌体中浓度很低，并与许多杂质夹杂在一起，同时发酵液或生物溶液又属于非牛顿型流体，所以必须进行预处理。 2、预处理的目的 改变发酵液的物理性质，促进从悬浮液中分离固形物的速度，提高固液分离器的效率； 去除发酵液中的部分杂质，以利于后续各步操作。 尽可能使产物转入便于后处理的一相中。 3、发酵液预处理的方法 发酵液过滤特性的改变 降低液体粘度 调节悬浮液的pH值 凝聚和絮凝 使用助滤剂 加入反应剂 初步纯化 高价无机离子的去除 杂蛋白的去除 降低液体粘度 加水稀释法 能降低液体粘度，但会增加悬浮液的体积，加大后继过程的处理任务。 稀释后过滤速率提高的百分比必须大于加水比才能认为有效，即若加水一倍，则稀释后液体的粘度必须下降50％以上才能有效提高过滤速率。 降低液体粘度 升温法 可有效降低液体粘度，提高过滤速率。 在适当温度和受热时间下可使蛋白质凝聚，形成较大颗粒的凝聚物，进一步改善了发酵液的过滤特性。 注意事项： 温度必须控制在不影响目的产物活性变质的范围内； 如温度过高或时间过长，会使细胞溶解，胞内物质外溢，增加发酵液的复杂性，影响其后的产物分离与纯化。 调节悬浮液的pH值 调节悬浮液的pH值 利用酸碱性来调液pH值使氨基酸、蛋白质等两性物质达到等电点得以除去。 在膜过滤中，发酵液中的大分子物质易与膜发生吸附，通过调整pH值改变易吸附分子的电荷性质，即可减少堵塞和污染。 细胞、细胞碎片及某些胶体物质等在某个pH值下也可能趋于絮凝而成为较大颗粒，有利于过滤的进行。 凝聚和絮凝 采用凝聚和絮凝技术能有效改变细胞、细胞碎片及溶解大分子物质的分散状态，使其聚结成较大的颗粒，便于提高过滤速率。 能有效地除去杂蛋白和固体杂质，提高滤液质量。 常用于菌体细小而且粘度大的发酵液的预处理。 胶 体 胶体是一种分散质粒子直径介于粗分散体系和溶液之间的一类分散体系，这是一种高度分散的多相不均匀体系，分散质粒子在1nm—100nm之间。 细胞、菌体、蛋白质分子的水溶液表现出液溶胶的性质。 ζ电位 ζ电位的基本公式为： ζ＝4πqδ/D D—水的介电常数； q—胶体的电动电荷密度，即滑移面上的电荷密度； δ—扩散层的有效厚度， ζ电位与扩散层厚度δ和电荷密度q成正比，而扩散层厚度又与溶液中离子强度有关，当双电层的排斥力不足以抗衡胶粒间的范德华引力时，由于热运动的结果导致胶粒的互相碰撞而聚集起来。 ζ电位 ζ电位是控制胶粒间电排斥作用的电位，用来表征双电层的特征，并作为研究凝聚机理的重要参数。 胶粒能保持分散状态的原因主要是带有相同电荷和扩散双电层的结构，一旦由于布朗（Brown）运动使粒子间距离缩小到它们的扩散层部分重叠时，即产生使两个粒子分开的斥力，从而阻止了粒子的聚集。ζ电位越大，电排斥作用就越强，胶粒的分散程度也越大。 此外，由于胶粒表面的水化作用，形成了包围于粒子周围的水化层，也能阻碍胶粒间的直接聚集。 发酵液的胶体性质 水合膜和双电层的存在，使蛋白质的分子与分子之间不会相互凝聚，成为比较稳定的胶体溶液。 如果消除水合膜或双电层其中一个因素，蛋白质溶液就会变得不稳定，两种因素都消除时，蛋白质分子就会互相凝聚成较大的分子而产生沉淀。 凝聚（Coagulation） 胶体悬浮液中加入某种电解质，在电解质作用下，胶粒的双电层电位降低，使胶体体系不稳定，胶体粒子间因相互碰撞而产生块状凝集体（1mm左右）的现象。 阳离子对带负电荷的胶粒凝聚能力的次序为： 常用的凝