NMR波谱解析要点_12_11_2014.ppt.ppt

* 二维核磁共振时间轴方块图 二维谱有多种方式，但其时间轴可归纳为下图： 预备期 发展期 混合期 检出期 预备期：在时间轴上通常是一个较长的时期，它使实验前体系能回复到平衡状态； 发展期 (t1)：在t1开始时，由一个脉冲或几个脉冲使体系激发，使之处于非平衡状态。发展期的时间t1是变化的； 混合期 (tm)：在这个时期建立信号检出的条件。混合期有可能不存在； 检出期 (t2)：在检出期内以通常方式检出FID信号。 与t2轴对应的是通常的频率轴；与t1轴对应的，取决于发展期的过程。 二维核磁共振谱的分类 1、J分辨谱 (J resolved spectroscopy) J分辨谱亦称J谱，或称d-J谱，它把化学位移和自旋耦合的作用分辨开来。J谱包括异核J谱和同核J谱。 2、化学位移相关谱(chemical shift correlation spectroscopy) 化学位移相关谱也称d-d谱，是二维核磁共振谱的核心。它表明共振信号的相关性。有三种位移相关谱：同核耦合、异核耦合、NOE和化学交换。 3、多量子谱 (multiple quantum spectroscopy) 通常所测定的核磁共振谱线为单量子跃迁 (Dm = ±1)。发生多量子跃迁时Dm为大于1的整数。用脉冲序列可以检出多量子跃迁，得到多量子跃迁的二维谱。 J谱 同核J谱一般用于1H谱信号峰重叠较多的化合物的结构鉴定，可获得峰组的裂分和J值信息； 异核J谱主要用于碳原子级数的确定，现在很少使用。 异核位移相关谱 1H-13C COSY (correlated spectroscopy) 是1H和13C核之间的位移相关谱，它把直接相连的1H和13C核关联起来。 常用，与HMQC用途相同。 COLOC谱 (heteronuclear shift) correlation spectroscopy via long range coupling，长程耦合的 (异核位移)相关谱。 常用，与HMBC用途相同。 同核化学位移相关谱就是通过同核1H-1H之间的J耦合或NOE来建立核与核之间的联系的NMR谱，常见的有： COSY (又分为相敏COSY和幅度COSY) DQF-COSY E-COSY TOCSY NOESY ROESY 同核位移相关谱 1H-1H COSY 一般反映的是3J耦合关系，有时也会出现少数反映长程耦合的相关峰。但是，当3J太小时 (如二面角接近90o)，也可能没有相应的交叉峰。 DQF-COSY DQF-COSY的对角峰与其交叉峰一样也是正负交替的纯吸收峰，因此DQF-COSY对角线附近的谱峰结构比相敏COSY和幅度COSY好得多，适合于观察对角线附近的交叉峰，也可用来测量J耦合常数 。另外由于DQF-COSY只允许双量子信号通过，而水中的两个质子是磁等性核，不可能转换成双量子，因而水峰的干扰小. TOCSY COSY的交叉峰表明二个质子之间有J耦合，而TOCSY的交叉峰表明二个质子同属一个自旋系统 COSY谱（不考虑其精细结构） (a) 一个三自旋体系AMX ; (b) 两个三自旋体系AMX、A?M?X? TOCSY谱 (a) AMX体系，(b) AMX和AMX体系 TOCSY是同相谱，可提供整个自旋体系的连接，而且信号强，对于谱峰证认很有用。 NOE类二维核磁共振谱 NOE产生的机制磁性核之间的偶极耦合 (dipole coupling)。 磁性核具有磁矩 (magnetic moment)，两个磁矩通过空间有相互作用。因此只要二者空间距离在一定范围内，这种作用就能反映出来。由于是磁矩之间的作用，因而称为偶极耦合。 NOE与化学健的存在与否无关，决定因素仅在于空间距离的远近。 NOE (nuclear Overhauser effect) NOESY 二维NOE (nuclear Overhauser effect spectroscopy) 对于确定有机化合物的构型、构象、蛋白质分子在溶液中的二级结构非常重要。 NOESY是通过NOE效应来建立核与核之间的联系的，NOESY的交叉峰表明二个质子之间有足够强的NOE效应，由交叉峰强度可得出核与核之间的距离 通常二个质子之间的距离不大于5?时才可能观测到NOE效应 ROESY ROESY是旋转坐标系中的NOESY (rotating frame Overhauser effect spectroscopy)。 有时中等大小的分子NOE的增益为零，此时测定在旋转坐标系中的NOESY，则是一种理想的解决方法。 不管分子量的大小，在旋转坐标系中二个质子间的交叉弛豫速率总是正的, 因而交叉峰与对角峰符号相反，通常对角峰调成正峰，而交叉峰为负峰。 异核位移相关谱 磁化 磁化(向量): 单位体积中某种核