【2017年整理】间质性肺炎病毒上呼吸道感染后病毒载量变化与急性中耳炎的发展.docVIP

间质性肺炎病毒感染上呼吸道后病毒载量的变化与急性中耳炎的发展 张伟 译，鲍诗平 审校 Johanna Nokso-Koivisto, et al. VIRAL LOAD AND ACUTE OTITIS MEDIA DEVELOPMENT AFTER HUMAN METAPNEUMOVIRUS UPPER RESPIRATORY TRACT INFECTION. The Pediatric Infectious Disease Journal ,2012,31(7):763-766. 摘要：研究上呼吸道感染（URI）中，人类肺间质肺炎病毒（hMPV）在急性中耳炎发病中的作用。对200例URI患儿700例鼻咽分泌物涂片进行评估；其中47例（7%）为hMPV阳性，25例（3.6%）hMPV为hMPV单一病毒。总体上，仅24%感染hMPV 的URI患儿伴发急性中耳炎，与其他呼吸道病毒感染的急性中耳炎发病率相比，发病率最低。发热患儿中hMPV病毒载量显著增高。在hMPV阳性的URI患儿中，伴发急性中耳炎与未伴发急性中耳炎两组患者的病毒载量没有差异。 关键词：肺间质肺炎病毒；上呼吸道感染；急性中耳炎；病毒载量 人类肺间质肺炎病毒（hMPV），首次发现于2001年[1]，它是一种呼吸道病毒，属于副粘病毒科，与呼吸道合胞病毒（RSV）同属于肺炎病毒亚科。许多研究表明，世界上几乎所有儿童在5岁前都曾感染过hMPV。综合各年龄组的情况，引起的呼吸道感染症状中，轻者仅出现上呼吸道感染（URI），重者累及下呼吸道[2–7]。 因为病毒分离存在困难，分子学检验已经应用于hMPV感染的诊断。但是呼吸道病毒核酸扩增分析敏感性较高，其阳性率临床上遭到质疑。检测相关临床疾病是否存在特异性病毒感染的另一种方式是通过测定病毒载量来确定；有研究表明高hMPV病毒载量和重症下呼吸道感染存在相关性[3,8,9]。 因hMPV种系来源和临床表现上与RSV相似[1,5]，因此可以推测hMPV同样具有嗜耳性，有引发急性中耳炎（AOM）的趋势。在急性中耳炎期间，鼻咽分泌物涂片、中耳积液病毒检测的阳性率分别为8–13%[11,12]和2.3%[12]。但是hMPV诱发儿童急性中耳炎的机制需要进一步的研究。 笔者曾经比较上呼吸道各种病毒感染的中耳炎并发症的发病率[10]，在该研究中并未提及hMPV等新兴病毒。本次研究的目的在于明确hMPV在上呼吸道感染的中耳炎并发症中的发病机制以及明确hMPV病毒载量是否与上感后急性中耳炎的发病相关。 材料和方法 我们通过一项前瞻性的横断面研究收集标本和临床数据。该研究的目的旨在调查儿童上呼吸道感染伴发急性中耳炎的发病率和临床特点。研究时间为2003年1月至2007年3月，经当地审查委员会批准，研究由位于德克萨斯州加尔维斯顿的德克萨斯大学医学分校执行。研究方案如前述。简述之，研究对象为6个月到3岁的健康儿童；随访1年内的伴发AOM的URI的发生。当患儿出现URI症状时，由患儿父母通知研究人员。研究医生接诊患儿，并随访其后的4周AOM的发生情况。随访期间，患儿接受耳镜检查、体格检查、声导抗检查。URI伴发AOM，定义为URI出现后28天内发生的AOM。临床表现为：（1）具备急性中耳炎症状（2）鼓膜炎症体征和（3）耳镜或声导抗检查证实存在中耳积液。中耳炎倾向，定义如下：1年内中耳炎发作≥4次，或6个月内≥3次，或6岁前≥6次或第一性中耳炎发作小于6?月龄。 在URI起病7天内和AOM确诊时采集呼吸道标本。利用鼻拭子进行病毒学培养，利用附粘液池的吸管收集鼻咽部分泌物进行其他病毒学检查（Mucaid，Laboratoires Pharmaceutiques Vygon，écouen，France）。标本收集完毕，用1mL磷酸盐缓冲液冲洗吸管和粘液池，以获取尽可能多的标本，记录液体总量以计算原始标本的稀释情况。 前期研究包括标准法鼻拭子病毒培养，RSV流行季节同时进行RSV抗原的酶免测定。对病毒培养及酶免测定阴性的标本进行多聚酶链式反应分析（PCR），检测病毒包括呼吸道合胞病毒A、B，副流感病毒1~3，流感病毒A、B，同时进行实时PCR分析，包括腺病毒、肠道病毒、鼻病毒和冠状病毒的测定（OC43,229E和NL63；美国威斯康星州密尔沃基医学院执行，WI）。 具体到本报道，我们对727例鼻咽分泌物标本进行了hMPV的定量PCR分析（qPCR）。利用MagMAX全核酸纯化试剂盒(Ambion/Applied Biosystems, Austin, TX，in Biosprint 96，Qiagen, Valencia, CA)对200uL鼻咽分泌物标本进行核酸提取。完成提取后，用不含核酸的0.1mmol/L乙二胺四乙酸(Ambion/Applied Bio