《导学教程》高三生物一轮总复习讲义：选修一专题二　微生物的培养和利用Word版含解析.docVIP

专题二　微生物的培养和利用 [考纲要求] 1．微生物的分离和培养。2.某种微生物数量的测定。3.培养基对微生物的选择作用。 考点1　微生物的分离与培养 1．微生物的实验室培养 (1)培养基 ①种类→液体培养基，固体培养基(按物理性质分)。 ②成分→碳源、氮源、水、无机盐、生长因子。 (2)制备固体培养基 一般步骤：计算→称量→溶化→灭菌→倒平板。 (3)无菌技术 ①消毒→较为温和的物理或化学方法，不能杀死芽孢和孢子。 ②灭菌→强烈的理化因素，杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。 (4)无菌技术的类型、方法及对象(连线) (5)纯化大肠杆菌 平板划线法；稀释涂布平板法。 (6)菌种保存 临时保存，4℃(冰箱)；长期保存，甘油管藏法。 2．无菌技术 (1)目的：获得纯净的培养物。 (2)关键：防止外来杂菌的入侵。 1．正误判断 (1)培养基分装到培养皿后进行灭菌(2013·江苏)(×) (2)从有机废水中分离分解有机物的微生物时，接种后的培养皿须放在光照培养箱中培养(2013·江苏)(×) (3)消毒的原则是既杀死材料表面的微生物，又减少消毒剂对细胞的伤害(2013·重庆)(√) (4)培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐，有时还需要加入一些特殊的物质(√) (5)无菌操作的对象只要是没有生物活性的材料(如培养基、接种环等)都可采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌(×) (6)下图中甲为平板划线法中最重要的环节，乙为操作的结果： ①每一次划线后要将接种环灼烧(√) ②除第一次划线外，每一次划线的起点都是第一次划线的末端(×) (7)用稀释涂布平板法纯化大肠杆菌时，只要稀释度足够高，就能在培养基表面形成单个菌落(√) 2．如图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图，请思考。 (1)获得图A效果和B效果的接种方法分别是什么？ (2)某同学在纯化土壤中的细菌时，发现培养基上的菌落连成一片，最可能的原因是什么？应当怎样操作才可避免此种现象？ 提示　(1)获得效果A的接种方法为稀释涂布平板法，获得效果B的接种方法为平板划线法。 (2)最可能的原因是菌液浓度过高或划线时在划下一区域前未将接种环灭菌；采取的措施是增大稀释倍数或每次划新区域前先将接种环灭菌。 1．消毒和灭菌的不同点 比较项目 理化因素的作用强度 消灭微生物的数量 芽孢和孢子能否被消灭 消毒 较为温和 部分生活状态的微生物 不能 灭菌 强烈 全部微生物 能 2.两种纯化细菌方法优缺点的比较 (1)倒平板的方法及注意事项 a．请用文字和箭头写出正确的倒平板操作流程：丙→乙→甲→丁。 b．甲、乙、丙中的灭菌方法是灼烧灭菌。 c．丁中的操作需要等待平板冷却凝固才能进行。 (2)常用的微生物接种方法有两种 a．平板划线法：是通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面(如图)。 几种划线方法示意图 b．稀释涂布平板法：是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。 系列稀释操作(如下图所示)： 涂布平板操作(如下图所示)： (3)平板划线法与稀释涂布平板法的比较 项目 优点 缺点 平板划线法 可以观察菌落特征，对混合菌进行分离 不能计数 稀释涂布平板法 可以计数，可以观察菌落特征 吸收量较小，较麻烦，平板不干燥效果不好，容易蔓延 3.纯化大肠杆菌的方法 (1)纯化培养原理：想方设法在培养基上得到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的菌落，即可获得较纯的菌种。 (2)纯化大肠杆菌的关键步骤：接种。 1．微生物的分离和培养是现代生物工程应用中的重要环节。下图甲、乙是大肠杆菌分离和培养过程中部分操作和实验结果示意图，请据图回答有关问题： (1)上图甲所示的是制备固体培养基时的实验操作步骤之一，它称为________________，若用该培养基培养大肠杆菌，除考虑营养条件外，还要考虑________________、________________和渗透压等条件。 (2)培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是_________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 (3)上图乙是平板划线法接种操作示意图，正确的操作顺序是A→B→________________(用字母和箭头表示)；找出图乙中两处错误的操作________________、________________(用字母表示