细胞悬液。.pptVIP

【实验目的】 1．练习进行细胞计数，并用细胞计数法绘制生长曲线，以了解培养细胞的生长发育特性 2．掌握测定细胞活力的方法 细胞计数及活力测定 Experiment 18 【实验目的】 培养的细胞在一般条件下要求有一定的密度才能生长良好，所以要进行细胞计数。计数结果以每毫升细胞数表示。细胞计数的原理和方法与血细胞计数相同。 在细胞群体中总有一些因各种原因而死亡的细胞，总细胞中活细胞所占的百分比叫做细胞活力，由组织中分离细胞一般也要检查活力，以了解分离的过程对细胞是否有损伤作用。复苏后的细胞也要检查活力，了解冻存和复苏的效果。 用台盼兰染细胞，死细胞着色，活细胞不着色，从而可以区分死细胞与活细胞。利用细胞内某些酶与特定的试剂发生显色反应，也可测定细胞相对数和相对活力。 【实验材料】 一、材料：细胞悬液。 二、器材：普通显微镜、血球计数板、试管、吸管、酶标仪（或分光光度计） 三、试剂：0.4％台盼兰，0.5％四甲基偶氮唑盐（MTT）、酸化异丙醇 （1）0.4%台盼兰染液配制：?台盼兰 0.4克 加双蒸水至100 ml。 （2）MTT配制：MTT 0.5克，溶于100 ml的磷酸缓冲液或无酚红的基础液中。4℃下保存。 （3）酸化异丙醇配制：异丙醇中加入HCl使最终达0.04mol/L。 【实验内容】 1．细胞计数 ①将血球计数