第十二章核酸的合成要点.ppt

（四） tRNA的转录后加工 1.剪切；内切酶P切除5’端前导序列 外切核酸酶D切除3’端尾随序列 2.加接3’端CCA-OH端 3.修饰碱基（稀有碱基） 5′···GCAGTACATGTC ···3′ 3′··· c g t g a t g t a c a g ···5′ 5′···GCAGUACAUGUC ···3′ N······Ala · Val · His · Val ······C 编码链 模板链 mRNA 蛋白质 转录 翻译 （二）RNA聚合酶 1、原核生物的RNA聚合酶 ω 功能未知 核心酶 (core enzyme) 全酶 (holoenzyme) ?? ? ? ? ? ?? ? ? ? ω ω RNA聚合酶全酶在转录起始区的结合 ω 2、真核生物的RNA聚合酶 （三）模板与酶的辨认结合 mRNA 元核生物转录单位(操纵子) 包括编码序列与相关调控序列（如启动子）。 5?3? 3?5? 编码序列 调控序列 RNA-pol RNA聚合酶结合模板DNA的部位，称为启动子(promoter)。 RNA聚合酶保护法 转录起始点 T T G A C A A A C T G T -35 区 Pribnow 框， RNA-pol牢固结合位点 T A T A A T Pu A T A T T A Py -10 区 1 -30 -50 10 -10 -40 -20 5 ? 3 ? 3 ? 5 ? 原核生物启动子保守序列 RNA-pol认别位点 5? 5? RNA聚合酶保护区 编码序列 3? 3? TATA盒 CAAT盒 GC盒 增强子 顺式作用元件 结构基因 -GCGC---CAAT---TATA 转录起始点 真核生物启动子保守序列 -35 区 -10 区 二、转录过程 1. ? 辨认其始点，带动RNA全酶（?2???ω?)与模板启动子结合形成闭合复合物； （一）起始阶段 原核生物的转录过程 2. 在Pribnow框(富含AT碱基）处DNA双链被解开，形成开放复合物； Pribnow盒(富含AT碱基） 3. 在RNA聚合酶作用下发生第一次聚合反应； 5?-pppG -OH + NTP ? 5?-pppGpN - OH 3? + ppi （二）延长阶段 1. ?亚基脱落，RNA–pol聚合酶核心酶变构，与模板结合松弛，沿着DNA模板前移（转录空泡）； 2. 在核心酶作用下，NTP不断聚合，RNA链不断延长。 (NMP) n + NTP ?? (NMP) n+1 + PPi 转录空泡(transcription bubble)： RNA-pol （核心酶） ···· DNA ···· RNA 5? 3? DNA 原核生物转录过程中的羽毛状现象 核糖体 RNA RNA聚合酶 （三）终止阶段 指RNA聚合酶在DNA模板上停顿下来不再前进，转录产物RNA链从转录复合物上脱落下来。 分类： 1.依赖?因子的转录终止 2.非依赖?因子的转录终止 1. 非依赖 ?因子的转录终止 DNA模板上靠近终止处，有些特殊的碱基序列，转录出的RNA特征： 产物形成G-C回文序列，形成发夹结构 发夹结构后有一连串U 5`UUGCAGCCUGACAAAUCAGGCUGAUGGCUGGUGACUUUUUAGUCACCAGCCUUUUU... 3` 5`UUGCAGCCUGACAAAUCAGGCUGAUGGCUGGUGACUUUUUAGUCACCAGCCUUUUU... 3` RNA 5?TTGCAGCCTGACAAATCAGGCTGATGGCTGGTGACTTTTTAGTCACCAGCCTTTTT... 3? DNA UUUU...… UUUU...… 5`UUGCAGCCUGACAAAUCAGGCUGAUGGCUGGUGACUUUUUAGUCACCAGCCUUUUU... 3` 发夹结构 A T P 2. 依赖 ?因子的转录终止 具有ATP酶活性和解旋酶活性 三、真核生物的转录后加工 （一）mRNA前体的转录后加工 hnRNA mRNA 1.首、尾修饰 5?端形成 帽子结构(m7GpppGp —) 3?端加上多聚腺苷酸尾巴(poly A tail) 帽子结构 加帽酶、甲基转移酶 真核生物结构基因，由若干个编码区和非编码区互相间隔开但又连续镶嵌而成，这些基因称为断裂基因。 断裂基因(splite gene) C A B D 外显子 A、B、C、D