03第三章 酶01课件.pptVIP

不同酶最适pH不同 一般在6-8 动物多在6.5-8.0 植物多在4.5-6.5 也有许多酶的pH偏酸或偏碱,例如:胃蛋白酶1.9;肝脏中的Arg酶9.0-9.7 竞争性抑制剂举例 乳酸脱氢酶同工酶形成示意图 丙酮酸脱氢酶催化葡萄糖降解中的一步关键反应，丙酮酸脱羧生成乙酰辅酶A和二氧化碳。这个反应将酵解途径与柠檬酸循环联系起来。丙酮酸脱氢酶的磷酸化是一个别构酶－丙酮酸脱氢酶激酶催化的，结果使脱氢酶失活。激酶可以被几种代谢物激活。磷酸化的丙酮酸脱氢酶可以通过酶中磷酸丝氨酸残基水解而恢复活性，反应是由丙酮酸脱氢酶磷酸化酶催化的，该磷酸酶受Ca 2+激活。 无活性 有活性 磷酸化酶b 无活性 磷酸化酶a 有活性 （三）诱导酶： 1、诱导酶与结构酶：根据酶的合成与代谢的关系， 人们把酶相对的分为： 酶 结构酶：细胞中天然存在，含量稳定，受外界影 响小的酶。 诱导酶：是指细胞中加入特定诱导物质诱导产生 的酶。它的含量在诱导物存在下显著提 高。这种诱导物往往是该酶的底物或底 物类似物。 2、举例：大肠杆菌的?-半乳糖苷酶的合成要有乳糖的存在，乳糖对?-半乳糖苷酶的生成起诱导作用，是诱导剂，而?-半乳糖苷酶称为诱导酶。详细内容在后续内容中讲解。 （四）多酶复合物 　　主要指多个酶彼此有机地组合在一起，精巧的镶嵌成一 定的结构，形成的复合物。在功能上，各个酶相互配合，第 一种酶的反应产物即为第二种酶的底物，如此依次进行，直 到全系统的各种酶都参加了各自承担的催化反应为止。例如 大肠杆菌的丙酮酸脱氢酶系等。 七、酶的活力测定 2、测定酶活力就是测定酶促反应初速度： ⑴测酶活力时，条件固定且一般为最适条件。 ⑵可测定底物消耗量，但通常测定产物生成量。 ⑶测定方法手段多种多样，如分光光度法、电化学法、萤光法、 化学滴定法、同位素技术等。 (一) 酶活力与酶促反应速度 1、酶活力：酶加速其催化的化学反应的能力。催化反应速 度越大，活力越高，反之，则低。故测定酶的活力，本质 上是测定酶的反应速度。 2、开特(katal,简称kat): 1开特=6×107U 1U=16.67×10-9开特 1开特：是指每秒钟转化1摩尔底物所需要的酶量。或1分钟 内催化60mol的底物转化。 3、自定义单位： 最常用的，但有弊端易引起混乱，如? -淀粉酶可定义： 可用每小时催化1g可溶淀粉水解所需的酶量为一个酶的单位， 也可用每小时催化1ml 2%溶液所需的酶量为一个酶单位。 (二) 酶活力单位 1、国际酶单位：在最适条件下(pH为最适，但温度规定为 25℃)每分钟催化1微摩尔底物转化为产物所需要的酶量为1个 国际酶单位(enzyme unit)简称“U”。 (三) 比活力 是指每mg酶蛋白质所具有的酶活力 ，可用国际单位 (u/mg蛋白质)表示。同一酶的比活力越高，表明酶越纯。 即，比活力越高，酶的纯度越高;比活力越低，纯度越低。 比活力= 酶活力单位数 酶蛋白质mg数 酶制品纯度(%)= 酶制品比活力 纯酶的比活力 ×100% 酶的“纯化倍数”= 酶制品的比活力(纯化后) 抽提液的比活力(纯化前) 酶的“回收率”= 酶制品的总活力(纯化后) 抽提液的总活力(纯化前) ×100% 一个好的酶的分离纯化方法应当是纯化倍数高，总活力的回收率大。前者表示浓缩纯化的方法好，后者表示纯化过程中酶的损失小。 (四) 催化中心活性——酶的转换数 当酶被底物完全饱和时，每单位时间内每个酶分子（或每一活性中心）所能转换的底物分子数。 酶的转化数(Kcat)：指的是“分子活力”或“摩尔活力”。 在最适条件下每摩尔每分钟转换的底物摩尔数对多亚基的 酶(多个活性中心) 则为每摩尔活性中心在最适条件下每分钟转 换成底物的摩尔数——摩尔活性。 一般来说，Vmax不是酶的特征常数。但当酶的浓度一定，且底物浓度远远大于酶的总浓度Et的情况下，对酶的特定底物而言，其最大反应速度一定；当酶被底物完全饱和时，每单位时间内每一活性中心或每分子酶所能转换的底物分子数表示一个酶的转换数，因为Vmax= ? cat（Et）,故转换数可用下式表示： 转换数（ ? cat ）= Vmax / （Et） 如碳酸酐酶的浓度为10-6mol/L。当它完全被底物饱和时，每秒可催化0.6mol碳酸产生，那么? cat =6×105/s。 酶的Kcat指每