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                第四章  生物氧化与氧化磷酸化 第四章  生物氧化与氧化磷酸化   第一节  生物氧化概述 (二)生物氧化的特点 三、高能化合物 (二)高能化合物类型 2) 酰基磷酸化合物 3) 烯醇式磷酸化合物 2、氮磷键型N~P 4、甲硫键型 常见磷酸化合物标准水解自由能ΔG°′	 (三)最重要的高能化合物--ATP 烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(nicotinamide adenine dinucleotide) (一)黄素蛋白 (二)Fe-S蛋白 (三)CoQ (四)细胞色素(Cyt)类 (四)细胞色素(Cyt)类 3、 Cytc  4、Cytaa3 呼吸链组分排列顺序及氧化还原电位 NADH呼吸链电子传递过程的循环 呼吸链组分在线粒体内膜上的分布 四、呼吸链的电子传递抑制剂 四、呼吸链的电子传递抑制剂 四、氧化磷酸化的解偶联和抑制 1、 磷酸甘油穿梭(肌肉细胞、大脑细胞) 2、苹果酸穿梭(肝细胞)   六、能荷 五、线粒体内膜的物质转运     细胞内的ATP主要在线粒体内由ADP磷酸化而成,大部分ATP在线粒体外被利用后又变为ADP。由于ADP和ATP都不能自由地穿过线粒体内膜,因而必需有一种机制将线粒体外的ADP运入,同时把ATP运到线粒体外。现已证实由线粒体内膜上的腺苷酸载体(二聚体,只有一个腺苷酸结合位点)负责其双向运输,又称ADP/ATP交换体。面向外侧时结合位点对ADP亲和力高,面向内侧时结合位点对ATP亲和力高。  (一)腺苷酸的转运 ADP、ATP、Pi的转运 生物氧化和氧化磷酸化主要在线粒体内进行,而NAD+和NADH不能自由地透过线粒体内膜,因此在胞液内生成的NADH必须通过特殊的穿梭机制进入线粒体。已知动Cell有两个穿梭系统。 五、线粒体内膜的物质转运 (二) NADH的转运 五、线粒体内膜的物质转运 (二) NADH的转运 产生2个ATP 多肽链 多肽链 Fe2+                     Fe3++e- 二、电子传递链的组成成分 Cyt 分子中含有血红素铁,以共价形式与蛋白结合,呼吸链中有5类:细胞色素a、a3、b、c、c1,其中a、a3含有铜原子。 1、Cytb  是膜的嵌入蛋白,可接受CoQ的电子。 2、Cytc1 是膜的嵌入蛋白,与Cytb组成一个复合体,它可接受Cytb的电子,并把它传给Cytc 。 二、电子传递链的组成成分 是膜上唯一的外周蛋白,处于膜的外侧,可接受Cytc1的电子,并传给Cytaa3。 (四)细胞色素(Cyt)类 二、电子传递链的组成成分 两个细胞色素的复合体,跨膜蛋白,含有Cu离子。Cyta接受Cytc的电子,经过Cu传给a3。Cyta3的活性中心在膜的内侧,可以将其电子直接传给氧分子而生成水。 该复合体又称为细胞色素氧化酶   呼吸链末端氧化酶 (四)细胞色素(Cyt)类 二、电子传递链的组成成分 上述电子传递链组分除泛醌和细胞色素C外, 其余组分形成嵌入内膜的结构化超分子复合物。 复合物I:又称为NADH?CoQ还原酶, 它的作用是催化NADH的氧化脱氢以及CoQ还原。包括以FMN为辅基的黄素蛋白和多种铁硫蛋白。 复合物Ⅱ:又称为琥珀酸?CoQ还原酶,它的作用是催化琥珀酸的脱氢氧化和CoQ的还原。包括以FAD为辅基的黄素蛋白、多种铁硫蛋白和细胞色素b560。 复合物Ⅲ:又称为CoQ -Cytc还原酶, 其作用是催化还原型CoQ的氧化和细胞色素c的还原。包括细胞色素b(b562、b566)和c1,以及铁硫蛋白。 复合物IV:又称为Cytc 氧化酶、末端氧化酶,它的重要作用是将电子从Cytc传递给氧。包括cyt aa3和含铜蛋白。 电子传递链组分形成的超分子复合物 根据标准氧还电位E0’的高低排列;  三、呼吸链的电子传递顺序 研究方法: 根据电子传递体氧化还原态的吸收光谱变化进行检测 利用阻断剂研究分析 四种复合物的电子传递再造实验 电子传递方向性由氧化还原电位决定 电子从E0′值小的传递体向E0′值大的传递体传递 琥珀酸 → FAD → CoQ →  b →  c1    → c  → aa3   → O2                            +0.06 三、呼吸链的电子传递顺序 Cytc 外膜 膜间空间 内膜 胞液 衬质 NADH+H+ FMN Fe-S CoQ Fe-S FAD Cytb Fe-S Cytc1 Cytc O2 Cyta Cyta3 琥珀酸       能够阻断呼吸链中某一部位电子传递的物质,称为电子传递抑制剂。     利用专一性电子传递抑制剂选择性地阻断呼吸链中某个传递步骤,再测定链中多组分的氧化还原态情况,是研究电子传递链顺序的一种重要方法。        原理如通水管中的流水一样,正常情况下,连通管中的水位,越靠近出水管
                
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