第6章 生物氧化37080幻灯片.pptVIP

本章思考题 1.何谓呼吸链？请说明呼吸链的组成和排列顺序。 2.简述氧化磷酸化偶联及解偶联机制? 3.阐述ATP合酶的结构及其合成ATP机理。 4.论述氧化磷酸化作用机制的化学渗透学说的主要论点是什么? 四、呼吸链的电子传递抑制剂 1、概念 能够阻断呼吸链中某部位电子传递的物质称为电子传递抑制剂。 利用专一性电子传递抑制剂选择性的阻断呼吸链中某个传递步骤，再测定链中各组分的氧化-还原状态情况，是研究电子传递中电子传递体顺序的一种重要方法。 2、常用的几种电子传递抑制剂及其作用部位 （1）鱼藤酮、安密妥、杀粉蝶菌素：其作用是阻断电子在NADH—Q还原酶内的传递，所以阻断了电子由NADH向CoQ的传递。 （2）抗霉素A：它是由链酶素分离出的抗生素，有干扰细胞色素还原酶中电子从细胞色素bH的传递作用，从而抑制电子从还原型QH2向cytC1的传递作用。 （3）氰化物（CN-）、叠氮化物（N3-）、一氧化碳（CO）等：其作用是阻断电子在细胞色素氧化酶中传递，即阻断了电子由cytaa3向分子氧的传递。 鱼藤酮 安密妥 杀粉蝶菌素 抗霉素A 氰化物 一氧化碳 硫化氢 叠氮化合物 呼吸链的电子传递抑制剂图示 第三节 氧化磷酸化 一、氧化磷酸化的概念 二、氧化磷酸化的作用机制 三、质子梯度的形成 四、ATP合成机制 五、氧化磷酸化的解偶联和抑制 六、线粒体穿梭系统 七、能荷 一、氧化磷酸化的概念 概念 伴随电子从底物到氧的传递，ADP被磷酸化形成ATP的酶促过程即是氧化磷酸化作用。 根据生物氧化方式，可将氧化磷酸化分为 底物水平磷酸化 电子传递体系磷酸化。 底物水平磷酸化： ATP的形成直接由一个代谢中间产物（如磷酸烯醇式丙酮酸）上的磷酸基团转移到ADP分子上的作用。 电子传递体系磷酸化： 是指当电子从NADH或FADH2经过电子传递体系(呼吸链)传递给氧形成水时，同时伴有ADP磷酸化为ATP的全过程。通常所说的氧化磷酸化是指电子传递体系磷酸化。 二、氧化磷酸化的作用机制 (1)ATP产生的数量 研究氧化磷酸化最常用的方法是测定线粒体或其制剂的P/O比值和电化学实验。 P/O比值:是指每消耗一摩尔氧所消耗无机磷酸的摩尔数。根据所消耗的无机磷酸摩尔数，可间接测出ATP生成量。又可以看作是当一对电子通过呼吸链传至O2所产生的ATP分子数。 实验表明：NADH呼吸链的P/O值是3，即每消耗一摩尔氧原子就可形成3摩尔ATP，FADH2呼吸链的P/O值是2，即消耗一摩尔氧原子可形成2摩尔ATP。 (2)ATP产生的部位 ATP产生的部位都是有大的电位差变化的地方，例如，NADH呼吸链生成ATP的三个部位是：E0值在此三个部位有大的“跳动”，都在0.2伏以上。 (3) 能量偶联假说 氧化与磷酸化作用如何偶联尚不够清楚，目前主要有三个学说： 化学耦联学说 结构耦联学说 化学渗透学说 1.化学偶联假说（1953） 认为电子传递过程产生一种活泼的高能共价中间物。它随后的裂解驱动氧化磷酸化作用。 2.构象偶联假说（1964） 认为电子沿电子传递传递使线粒体内膜蛋白质组分发生了构象变化，形成一种高能形式。这种高能形式通过ATP的合成而恢复其原来的构象。 3.化学渗透学说（1961） 认为电子传递释放出的自由能和ATP合成是与一种跨线粒体的质子梯度相偶联的。 呼吸链存在于线粒体内膜之上，当氧化进行时，呼吸链起质子泵作用，质子被泵出线粒体内膜之外侧，造成了膜内外两侧间跨膜的化学电位差，后者被膜上ATP合成酶所利用，使ADP与Pi合成ATP。 1.递H体与递e体交替排列 2. 递H体有H泵作用，将2H+泵出内膜，2e传给递电子体，整个过程共泵出3对H+ 3.线粒体膜对H+不通透，造成H+跨膜梯度 4.H+通过ATP酶回流，生成ATP 质子的流向 电子的流向 ADP + P ATP 化学渗透假说示意图 化学渗透假说 化学渗透假说详细示意图 三、质子梯度的形成 电子传递使复合体Ⅰ、Ⅲ和Ⅳ推动H+跨过线粒体内膜到线粒体的间隙，线粒体间隙与细胞溶胶相接触。 H+跨膜流动的结果造成线粒体内膜内部基质的H+离子浓度低于间隙。线粒体基质形成负电势，而间隙形成正电势，这样产生的电化学梯度即电动势称为质子动势或质子动力势。其中蕴藏着自由能即是ATP合成的动力。 质子转移的机制有两种假设 质子传递链的4种电子传递复合体中的3种复合体都和质子转移有密切关系。质子主动转移和电子传递产生的自由能相偶联的机制当前存在两种假说： 氧化—还原回路机制 质子泵机制 四、AT