钉螺非特异性免疫因子溶菌酶进展技巧.doc

钉螺非特异性免疫因子溶菌酶研究进展 朱秀安，黄汉韬，杜康，汪安云，赵劲松* [摘要] 溶菌酶普遍存在于自然界的动物、植物、微生物体内，在动物体可作为一种天然的抗感染物质，是生物体内重要的非特异性免疫因子之一。本综述总结了近年来溶菌酶的分类、溶菌酶基因结构及功能、表达规律和影响溶菌酶活性的因素，为进一步探讨其在钉螺体内分布和细胞定位提供知识背景。 [关键词] 溶菌酶；钉螺；基因；表达；活性；定位 Research progress on the non-specific imm- une factors lysozyme of Oncomelania ZHU Xiu-an ,HUANG Han-tao ,DU Kang ,WANG An-yun ,ZHAO Jing-song* * Corresponding author [Abstract] The lysozyme generally exists in animals, plants and microorganisms, which can be used as a natural anti-infection material and is one of the important non-specific immune factors in organisms. The summary sums up the classification, the expression regulation, the gene structure and the function of lysozyme and the factors that affecting the activity of lysozyme and lysozyme orientation in the Oncomelania of recent years, in order to further discuss the lysozyme’s distribution in the Oncomelania and cellular localization providing background knowledge. [Key words] lysozyme; Oncomelania; gene; expression; activity; location 钉螺，隶属于腹足纲，钉螺属，是日本血吸虫唯一的中间宿主。钉螺体内有多种抗菌物质，如：凝集素；溶菌酶；抗菌肽等。溶菌酶，早在1922年Fleming[1]等在鸡蛋清、鸟蛋、人的鼻涕、唾液及眼泪等发现溶菌因子并命名为溶菌酶(lysozyme)。它是一种很有效的抗菌物质，全名为1，4-β-N-溶菌酶，又称粘肽N-乙酰基胞壁酸水解酶。在1965年，David Phillips 和他在牛津的同事以0.2nm分辨率的X射线晶体结构分析法阐明了溶菌酶的三维结构[2]。溶菌酶的本质就是蛋白质，其抑菌机制是破坏细菌的细胞壁，同时具有不易产生抗药性，代谢快，活性稳定的特性。 1 溶菌酶的分类 根据溶菌酶生物来源可以将溶菌酶分为6类：3种动物型溶菌酶，即C型 (chieken—lysozyme type)、G型 (goose—type)和I型 (invertebrate—type)；植物溶菌酶 (plant—type)；T4噬菌体溶菌酶 (phage—type)；微生物溶菌酶 (bacteria—type)[3]。溶菌酶在动物体内有C、G、I三型，但在脊椎动物中广泛存在C、G型，无脊椎动物中有C、G、I三型[4]。其中C型、G型、I型是研究最广泛、最透彻的溶菌酶。G型溶菌酶最初在鹅蛋清中被鉴定出来而得名，分型为OHLysG1，OHLysG2，OHLysG3，这三型是腹足类软体动物钉螺的表达序列标签[5]；从鸡蛋清中提取的C型溶菌酶HEWL (Hen egg white lysozyme) 是溶菌酶的原型，其分型有C-1, C-2, C-3三型，多拷贝C型基因存在于奥利亚罗非鱼等鱼类[6]。 2 溶菌酶的基因结构及功能 C型成熟溶菌酶的基因编码130个氨基酸残基[7]。G型溶菌酶基因外显子数量多变，如鱼类G型溶菌酶基因有5个外显子，人类有7个外显子，鸡和其他哺乳动物的G型溶菌酶有6个外显子；文昌鱼的C型溶菌酶和脊椎动物的类似，都含有4个外显子[8]。亚洲石斑鱼C型溶菌酶基因组序列从转录起始点到转录终止点由1491个碱基对组成，包括4个外显子和3个内含子，而G型溶菌酶基因的DNA序列由1232个碱基对组成，包括5个外显子和4个内含子[9]。软体动物鲍鱼G型溶菌酶基因组有7个外显子和6个内含子[10]，C型溶菌酶基因组有6个外显子和5个内含子[11]，而i型