模拟题答案[精选].docx

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模拟题答案[精选]

A卷一、1.色氨酸,酪氨酸,苯丙氨酸,280nm2.正,负,等电点3.酶蛋白,辅因子4.三磷酸腺苷,黄素单核苷酸,还原性烟酰胺腺嘌呤而核苷酸磷酸5.多聚腺苷酸尾巴,帽子6.α-螺旋,β-折叠7.丙酮酸脱羧酶,二轻硫辛酸转乙酰基酶,二氢硫辛酸脱氢酶8.异柠檬酸脱氢酶,α-酮戊二酸脱氢酶系,琥珀酸脱氢酶,苹果酸脱氢酶9.葡萄糖的直接氧化脱羧阶段,非氧化分子重排阶段,NADPH10.ATP,线粒体11.五种亚基,二、CCAAD CCDA三、1.P102 酶活力单位,指在25℃,最适pH,适当的底物浓度等特定条件下,在1min内能转化1umol底物的酶量或是转化底物中1umol的相关基因的酶量。2.P99 从不同种属或同一种属,甚至同一个体的不同组织或同一组织,同一细胞中分离出具体不同分子形式但却催化相同反应的酶。具有相同或相近的活性中心。3.P59 当蛋白质在某一pH溶液中,酸性基团带的负电荷恰好等于碱性基团带的正电荷,蛋白质分子净电荷为零,在电场中既不向阳极移动也不向阴极移动,此时溶液的pH称为等电点。4.P203 由非糖前体合成葡萄糖的过程5.P222 脂肪酸讲解的主要产物乙酰辅酶A或乙酸可通过乙醛酸循环,将2分子乙酰辅酶A合成1分子琥珀酸,通过糖异生转变成糖类物质。6.P308 在复制叉上新生的DNA链一条按5’-3’的方向(与复制叉移动方向一致)连续合成;另一条按5’-3’的方向不连续合成。7.P38 与2,4-二硝基氟苯反应:在弱碱性溶液中,氨基酸的α-氨基易与2,4-二硝基氟苯反应,生成黄色的二硝基苯氨基酸:最初被Sanger用于测定肽链N端氨基酸,又称Sanger反应。8.一类能识别并水解外源DNA双螺旋中4-6个碱基对所组成的特异序列的核酸内切酶,简称限制酶。9.控制转录起始的DNA上的一段特殊序列。10.编码同一种氨基酸的密码子成为同义密码子。这种现象成为密码简并性,简并性的存在减少了由于碱基取代造成的有害突变。四、1.课本P192.课本P14五、1.原理:聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质相对分子质量的方法,主要是根据各蛋白质组分的分子大小和形状以及所带净电荷多少等因素所造成的电泳迁移率的差别。在聚丙烯酰胺凝胶系统中,加入一定量的十二烷基硫酸钠( Sodium dodecyl sulfate,简称SDS)此时,蛋白质分子的电泳迁移率主要取决于它的分子量大小,而其他因素对电泳迁移率的影响几乎可以忽略不计。当蛋白质的分子量在15000~200000之间时,电泳迁移率与分子量的对数呈直线关系,符合下列方程式: lgMr= -b·mR + K式中:Mr为蛋白质分子量,MR为相对迁移率,b为斜率,K为截距。在条件一定时,b和K均为常数。将已知分子量的标准蛋白质的迁移率对分子量的对数作图,可获得一条标准曲线。未知蛋白质在相同条件下进行电泳,根据它的电泳迁移率即可在标准曲线上求得分子量。步骤(可简略):①制板:选取洗净烘干的玻璃板垂直放入制胶玻璃架上。玻璃板底部封闭,封闭的方法根据具体条件而定。②配胶:根据所测蛋白质分子量范围,选择某一合适的分离胶浓度,按照表—1所列的凝胶浓度、剂用量和加样顺序, 配制某一合适浓度的凝胶。③分离胶胶液的注入和聚合:用尖头滴管或注射器将凝胶液沿玻璃管内壁缓缓注入,直至6.5cm高度的标记处为止。用一注射器通过注射针头沿玻璃管内壁缓慢注入0.5~1cm高度的蒸馏水进行水封。水封的目的是隔绝空气中的氧,并有消除凝胶柱表面的弯月面,使凝胶柱顶部的表面平坦,水封存切忌注入的蒸馏水呈滴状垂直下落,否则会使顶部的凝胶浓度变稀,从而改变预定的凝胶孔径,并造成凝胶表面不平坦。水层放好后,静置凝胶液进行聚合反应,聚合时温度要与电泳时温度相同。正常情况10min开始聚合,应控制在30min~1h内聚合完成。刚加水时看出有界面,后逐渐消失,等到再看出界面时,表面凝胶已经聚合,再静置30min使聚合完全。④浓缩胶胶液的注入和聚合:用注射器或滴管吸去分离胶胶顶端的水封层,并用无毛边的滤纸条吸去残留的水液,滤纸尽量不要接触分离胶的胶面。按表—2选择合适浓度,按比例加入浓缩胶混合均匀灌胶。⑤加样:SDS-聚丙烯酰胺胶凝胶垂直板型电泳的加样方法:加样前先把凝胶板下边的封闭物胶条除去,请勿将凝胶板拉坏或产生气泡。用微量注射器按顺序从凝胶板顶部加样,每个凝胶孔只加一种样品,各15~20ul,稀溶液最多可加150~200ul。加样时,微量注射器的针头伸入凝胶孔的内部,但针头不要碰到胶面,缓缓加入,因样品比重较大于,因此样品液自动沉降在胶面上平铺成一层。在槽的一端缓慢加入电极缓冲液,不要把凝胶孔的样品冲跑。槽内的空隙完全充满电极缓冲液,不要产生气泡。⑥电泳:按正负极接通电源,打开电泳仪(仔细观察正负极的变化

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