高三生物物组织培养技术课件.ppt

植物组织培养技术 主要内容 植物组织的基本概念 植物组织培养的过程 植物组织培养影响因素 植物组织培养实验室的设置 (2) 外植体： 从活体植株上切下的，用于组织培养的细胞、组织和器官。一般包括茎尖、根、茎、叶、花、种子等器官以及他们形成的体细胞胚等材料。 (3) 脱分化： 已经高度分化的植物器官、组织或细胞，在切割损伤和培养物内外因素的共同作用下，逐渐丧失原来的分化结构和功能，最后形成无组织的细胞团或愈伤组织的过程。 (6)再分化： 已经脱分化的细胞在一定条件下，又可经过愈伤组织或胚状体，再分化出根和芽，形成完整植株 ，这一过程叫作再分化。 (7) 不定芽： 凡从叶、根、或茎节间等通常不形成芽的部位生出的芽，则统称为不定芽 MS培养基的配制操作步骤 （1）MS培养基母液的配制: MS培养基含有十几多种化合物，配制不方便也难称量准确，可将培养基中的各种成分扩大一定倍数分别称量，配成浓缩液，这种浓缩液叫做培养基母液。(母液配制见下表) （ 2）MS培养基的配制: 按比例分别取适量各种成分的母液，加入烧杯，称取蔗糖30g，琼脂7g，加水并加热使琼脂溶解，按照需要的浓度分别加入激素，用1mol/L NaOH和1mol/L HCl溶液调节pH至5.8~6.0。将配好的培养基迅速分装至150ml组培瓶中，拧上盖子，放入灭菌锅121℃，灭菌20min。 植物组培具体操作步骤 （1）取材： 取菊花生长旺盛的嫩枝(外植体不能太小，否则会影响愈伤组织的形成)。 （2）消毒： ①流水冲洗后,加少许洗衣粉刷洗,流水冲20分钟; ②放入75﹪酒精中摇动2~3次,持续30秒,无菌水冲洗2~3次，用无菌吸水纸吸干; ③在2﹪~10%的次氯酸钠溶液中消毒8~10分钟,无菌水冲洗2~3次，无菌吸水纸吸干。 （3）接种： 常用灭菌剂使用浓度及效果比较表 无菌苗培养 （1） 愈伤组织与不定芽的诱导培养 选用合适的培养基分别对植物材料进行愈伤组织和不定芽的诱导。 （2） 生根培养 选用生根培养基对无菌苗进行生根培养。 （3）材料的移栽及温室培养： 炼苗：先在外界环境闭瓶锻炼3天，再开瓶锻炼3天（以培养基上开始长出菌为宜）。 移栽：去净培养基，可先在灭过菌的珍珠岩或蛭石上培养使根系发达再转移到土壤中。 第五章 影响植物组织培养的影响因素及注意事项 影响植物组织培养的几个因素 植物的材料 培养基 植物激素 pH值 外界因素（温度，光照，通气状况，材料处理等） 组织培养实验室设置及设备介绍 实验室设置 * 植物组织培养的基本概念 (1) 植物组织培养: 在无菌培养的条件下，将离体的植物器官（根，茎，叶，花，果实等）、组织（形成层，花药组织等）、细胞（体细胞，生殖细胞等）以及原生质体等培养在人工配制的培养基上，并给予适当的培养条件，使其长成完整植株的过程。 (4)愈伤组织： 在人工培养基上由外植体脱分化形成的一团无序生长的薄壁细胞。（具有细胞分裂能力） (5) 胚状体： 在离体植物细胞、组织或器官培养过程中，由一个或一些体细胞，经过胚胎发生和发育过程，形成的与合子胚相类似的结构。 (8) 植物组织器官发生途径（见下图） 植物组织 培养过程 培养基的配置 无菌接种操作 培养 植物组织培养消毒与接种示意图 组织培养实验室设置简图