熊一虎_任务书和文献综述_20121105.docVIP

武汉生物工程学院毕业论文（设计）任务书 系别 生物科学与技术系 专业 生物技术专业 班级 09级本班首先要提前查阅资料文献，对本实验所需的材料进行准备，然后配置各个时期所需的培养基灭菌备用。 其次就开始对外植体消毒和接种培养，然后观察其生长情况并做好记录。 再次用不同的培养基对和茎根的诱导情况根据其生长情况建立高效的再生体系。 最后就是移栽。 目标通过以诱导芽，探索不同培养基对愈伤组织、芽和根诱导的影响，建立起了高效的再生体系。要求：① 严格按照无菌操作的要求进行包括培养基的配置，外植体消毒以及接种和培养。② 在培养的时候要注意温度水分以及通风光照等一些因子的控制。③ 在其生长期间，要做好真实的记录结果和现象。④ 根据试验结果，进行数据的统计学分析。 6.完成毕业论文（设计）所需的条件及上机时数要求 良好的无菌操作实验室，的培养室。一些灭菌接种等所需的试剂和仪器的齐全和完好。2012 年 9 月 日2012 年 9 月 日 2013 年 4 月 15 日[1]。其节间中空，节部膨大，不定根发达；单叶对生，叶片卵形或长卵形，两面被柔毛；每叶腋内由二花组成一小聚伞花序，花两侧对称，花冠唇形，初开时为白色，2~3 d后变成金黄色，故名金银花[2]。 忍冬为常用中药材，含有绿原酸、异绿原酸、黄酮化合物、芳樟醇、花醇等化合物，其中绿原酸和异绿原酸为主要有效成分[3, 4]，具有清热解毒、凉散风热和的抗菌消炎功效，因其具有抑菌谱广、疗效显著、毒副作用小的特点，故广泛应用于中医临床及中成药生产。忍冬为近年来被誉为“植物抗生素”。化学抗生素的滥用及其所带来的严重后果使得忍冬的需求量猛增，尤其是SRAS、禽流感和H1N1病毒病的发生与流行，为忍冬带来了巨大的市场空间[5]。 另外，忍冬是一种珍贵的观赏植物，花清香而引人，花期时间长，花形花色独特，黄白相间，清香扑鼻，花数多，是人们十分喜爱的观赏及绿化的极好材料[6]。 忍冬一般采用扦插、嫁接、分株或者压条繁殖，繁殖系数小，育苗周期较长，且易感染病菌，品种退化快。利用组织培养建立忍冬的无性繁殖体系，具有恢复和保持种性、固定优良性状，保证苗木的整齐性，快速大量繁殖优良品种的优势，可实现忍冬良种苗木工厂化、规模化育苗生产。忍冬组织培养始于20世纪80年代，但直到近几年才逐渐增多，已有关于山东忍冬[7]、湖南忍冬[8, 9]、广西忍冬[10]和四川忍冬[11]组织培养方面的报道。而对豫产道地中药材‘白云’忍冬的组织培养鲜有报道[12]。目前已在茎段[13-15]和芽培养[12]、离体叶培养[13, 16]、细胞培养[17]等方面取得了一定的进展。忍冬组培快繁技术不失为一种解决当前忍冬栽培种苗的好方法。 1 外植体的选择与灭菌 不同的外植体及采取时期对忍冬组织培养外植体存活和诱导丛芽影响较大。春秋季以顶芽为外植体较好。而全年采取带有对生腋芽茎段的灭菌效果均较差，产生褐化、污染和不萌发的情况比较多，成活率很低[18]。但由于取材方便，多数仍选用带腋芽的茎段，接种时将其剪成1.5~3.0 cm长。也有用萌发的冬芽芽尖作外植体材料[19]。 外植体消毒一般用70%~75%的乙醇和0.1% HgCl2。多采用70%~75%的乙醇浸泡外植体10~20 s，然后用0.1%~0.2% HgCl2消毒5~8min，最后用无菌水冲洗4~5次。李景刚等[7]则在外植体消毒前用紫外线照射20 min。为防止污染，可适量加入少量链霉素[19]。有试验表明，用滴加0.1 N的HCl或NaOH的酒精浸泡外植体，再置于加2~3滴吐温-80于0.1% HgCl2溶液中处理外植体的消毒效果更佳，这与金忍冬茎段和芽体密被绒毛有关[20]。 2 诱导生芽培养 大多研究认为，忍冬诱导培养选用MS培养基或稍加改良MS培养基的诱导效果较好，芽萌动较快。刘伟等[21]认为诱导芽的最佳激素组合是6-BA 0.1 mg/L + NAA 0.1 mg/L，但出芽率不是很理想。梁小敏等[22]认为材料在添加生长调节剂6-BA 0.5~1.0 mg/L、NAA 0~0.3 mg/L或IBA 0.1 mg/L的培养基上启动状况都比较良好，其中MS + 6-BA 0.1 mg/L + IBA 0.1 mg/L更为理想。向增旭和高山林[23]用B5培养基进行诱导也获得了成功，他们用的培养基是B5 + 6-BA 2.0 mg/L + KT 0.75 mg/L + IAA 0.25 mg/L。 一般认为诱导培养基的细胞分裂素和生长素浓度比为10~12.5:1时较好。高浓度的6-BA 不利于诱导生芽；高浓度的NAA 对腋芽有一定的抑制作用。方华舟等[24]认为MS + 6-BA 1.0 mg/L + NAA 0.