酶工程制药探析.ppt

* * 优点：结合牢固，稳定性好，可重复使 用，是目前研究最为活跃的方法。 缺点：反应剧烈，酶活性易受影响。 * * 2、交联法 酶分子的交联基团：－NH2、－OH、－SH等。 常用交联剂：戊二醛 用双功能和多功能试剂，使酶与交联试剂之间形成共价键的固定化方法。 类似于共价结合法，区别在于载体不同。 制备较困难，活性损失较大。 * * 3、包埋法 载体与酶溶液混合后，通过物理作用将酶限定在载体的网格中。 常用载体： 明胶、琼脂、琼脂糖、聚丙烯酰胺、海藻酸钠等。 优点：条件温和，酶活力回收较高。 缺点：酶易泄漏，扩散受限。 * * 网格型 将酶或者细胞包埋于高分子凝胶细微网格中。 微囊型 将酶或者细胞包埋于高分子半透膜中。 * * 酶的固定化方法 * * 固定化细胞的制备 细胞固定化技术，也称为第二代固定化酶。 为了减少从微生物细胞中分离提纯酶的麻烦，直接利用微生物细胞内的复合酶系统，所以将细胞固定化。 * * 二、固定化酶的性质和指标 酶固定化后结构发生变化， 活力下降。 带来扩散限制效应、空间障碍、载体的分配效应等 * * 1.固定化后酶活力的改变 大多数情况下，固定化后酶活力下降。 固定化胰蛋白酶对底物酪蛋白只显示原活力的30%，而对底物苯酞精氨酸-对硝基酰替苯胺的活力保持80%。 一般认为高分子底物受空间位阻的影响比低分子底物大。 * * 酶活力改变