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应用微生物技术期末考试知识点总结 （仅供参考，有不足之处指出完善） 第一章 应用微生物技术的基本操作（小题） ?湿热灭菌 1）常压蒸汽灭菌： 常压条件下，在不能密闭的容器内灭菌； 不具备高压蒸汽灭菌情况下，或不宜高压蒸煮的物质如糖液，牛奶，明胶； 温度不超过100℃，大多数微生物被杀死，芽孢细菌短时间不能杀死； 常压蒸汽持续灭菌：持续加热6-8h； 间歇灭菌：芽孢100℃短时间内不会失活而微生物营养体半小时即被杀死，芽孢萌发后耐热性消失，通过反复培养反复灭菌；； 2）高压蒸汽灭菌： 穿透力强，效果最好； 常用于培养基的灭菌； 培养基中某些成分分解氧化，酸度增加，pH下降0.2-0.3； 葡萄糖等 营养物质破坏，并形成一引起浑浊和沉淀；葡萄糖溶液分别灭菌，压力尽可能低些； 3?过滤除菌 用于多汁不宜用湿热灭菌的液体物质，如抗生素，血清，糖；发酵工业中无菌空气的制备 高温湿热短时灭菌： 不但灭菌时间短，而且培养基成分破坏小； 但温度高，对设备要求严格；120℃； 通气式发酵罐模式图（会画） 空气除菌流程； 1）采气：含菌少的空气：采气口距地面20-30m；郊区； 2）粗过滤器：捕集较大的灰尘颗粒； 3）空压机：能耗大； 4）储气罐：高温除菌； 5）冷却器：空气经压缩机后可达120℃高温，若不冷却会烧焦过滤介质；立式列管式热交换器，沉浸式热交换器，喷淋式热交换器； 6）油水分离器：空气经压缩机后会带上一些润滑油；空气冷却后，水汽凝结成水滴； 7）加热器：空气湿度仍较大；通过加热，降低空气湿度； 8）总过滤器，分过滤器 抢温接种：在固体料灭菌后不要使料温降得过低才接种，而在料温高于培养温度5-10℃接种；可使培养基在接种后得到适宜的温度条件，能迅速生长繁殖，长势好，杂菌不易滋生；适于芽孢菌和产生孢子的菌接种； 堆积起温：大量的固体曲料接种后，不要立即分装曲盘或上帘，先堆积起来，上加覆盖物，防止散热，使培养菌适应新环境条件，逐渐生长旺盛，产生较大热量使料温升高，再分装一定容器中培养；这样可避免一开始培养菌繁殖慢，料温上不去，拖延培养时间，水分蒸发大，杂菌易发展等缺点； 碳源：葡萄糖是最易利用的碳源，速效碳源；但高浓度葡萄糖加速菌体代谢，溶解氧不能满足需要，中间代谢物如乳酸丙酮酸不能完全氧化积累在菌体或培养基中，pH下降，微生物受到抑制； 淀粉为长效碳源，利用较慢，高浓度不会对微生物产生不利影响； 培养基添加的无机盐一般为：磷酸氢二钾和硫酸镁 习题：常压蒸汽灭菌时，为杀死芽孢，可用的方法有 和 ；高压蒸汽灭菌后，培养基的pH一般会 ；葡萄糖高压灭菌后会受到破坏，解决办法有 ；微生物工业上，培养基灭菌一般采用 温 时；培养基中含有机物浓度高时，灭菌时间应 ；微生物工业上，空气除菌流程包括 ；固体料要抢温接种，堆积起温，原因是什么；葡萄糖是速效碳源，使用时应注意什么；举例：生理酸性盐，生理碱性盐；绘制通风搅拌式发酵罐结构模式图； 根据微生物类型选择： 牛肉膏蛋白胨培养基（普通肉汤培养基）培养细菌； 高氏一号合成培养基培养放线菌； 麦芽汁培养基部养酵母菌； 查氏合成培养基培养霉菌； 通风发酵池（会画） 发酵工艺： 孢子：斜面；（2）种子：摇床或种子罐；（3）发酵：发酵罐或通风发酵池 第二章 微生物肥料概述 （本章需掌握一种微生物肥料如根瘤菌、磷细菌、钾细菌）下面以根瘤菌的生产为例来说： 一）菌种的制作 斜面培养 豆芽汁培养基：0.5kg绿豆芽，洗净放入锅里加水1kg煮沸20-30min，过滤即得豆芽汁，加20g琼脂加水0.5kg煮溶，过滤，混合后加糖，加碳酸钙，补水到1000ml，调pH6.8-7.2，121℃30min，趁热取出摆斜面； 28℃2-4d，菌苔长满取出放冰箱保存 二）扩大培养 1 固体扩大培养 用克氏瓶制成斜面，作斜面菌种或液体种子接种，菌苔长满； 2 液体扩大培养 三角瓶摇床培养； 500ml三角瓶装150ml培养基，28℃旋转式摇床230rpm，2-3d，每毫升含菌几十亿到一百亿；做种子； 3 发酵罐培养 培养基，罐体，管道消毒，接种量2-3%，28-30℃，罐压，通气量0.8-1：1，搅拌速度360rpm，培养两天； 三）吸附剂的准备和接种 草炭，含丰富有机质，保水力强，疏松不黏结，通气良好；晒干，打碎，过筛，除去石头，杂草，调pH6.8-7.6，用石灰或过磷酸钙调节；装瓶2/3或3/4，126℃2-3h； 接种： 接种室：接种前一天关闭门窗，用福尔马林熏蒸，紫外灯照射； 加压喷射法装瓶，或装袋（塑料袋用福尔马林熏）； 造粒方式：圆盘分开造粒； 生产流程： 斜面菌种，固体种子培养或液体种子培养，扩大培养； 草炭肥土晒干，粉碎，过筛，灭