白银重金属污染地区污灌农田土壤酶与细菌多样性研究.docVIP

白银重金属污染地区污灌农田土壤酶与细菌多样性研究 摘要：通过选择受重金属污染严重的有色金属基地——白银市矿区的土壤为研究对象，对该地区土壤中铜、铅、锌、镉四种重金属元素含量以及几种酶的活性进行分析测定，并通过PCR-DGGE方法研究了土壤细菌多样性，分析了重金属对酶活性和细菌多样性的影响。研究结果表明：东大沟污灌区为重度污染区，西北铜附近为轻度污染区。白银矿区不同土壤酶类对重金属的敏感性有明显差异；同时复合污染对土壤酶活性的影响效应亦不同，其对脲酶表现出协同抑制特征，对过氧化氢酶表现出一定的拮抗作用，转化酶和碱性磷酸酶主要因Cd浓度的变化而变化。DGGE分析显示土壤细菌多样性比较相似。12个样品中黄茂井40cm的细菌Shannon 指数最低，仅为2.510；而东大沟污灌麦地最高，为3.271±0.20。土壤酶与重金属的关系主要取决于土壤有机质、粘粒等含量的高低及它们对土壤酶的保护容量和对重金属缓冲容量的大小，土壤酶活性分布特征对矿区污染程度和土壤生态系统特性具有一定的指示作用。而土壤微生物对重金属复合污染所做出的反应是基于种群的群体性反应，需要综合重金属含量、土壤类型、地上植被等多种原因来分析重金属对微生物的影响。因此，仅仅从重金属的含量或污灌时间尺度上来评价土壤微生物多样性的降低或减少是不充分的。 关键词：重金属，土壤酶活性，微生物，细菌多样性 当今，随着现代工农业的迅速发展，“三废”排放量的日益增加，环境污染问题日趋严重，特别是重金属污染已引起国内外专家极大关注。重金属污染物质是人类生产生活过程中释放到地理环境中的主要物质成分之一[1]。近年来，西北干旱区在经济大开发的同时，城市污染不断恶化、污染速度不断加快[2,3,4]，尤其污水灌溉导致的农田土壤污染日益严重，这是人类在不久的将来必将面临的最困难的环境问题[5]。 虽然近年来土壤重金属污染已引起了我国的高度重视，但迫于水资源匮乏和农业增产的压力，污灌农田的面积仍在不断扩大。国内外众多学者已开始研究利用土壤酶活性和土壤微生物评价土壤重金属污染的可行性[6]。有关重金属污染对土壤酶活性影响的研究报道很多。Morenoa[7]等研究了Cd对土壤脲酶、脱氢酶活性及ATP含量的影响，表明Cd对土壤酶活性有明显的抑制作用。Speir[8]等研究了Cr和As对土壤生物的毒害作用，结果也表明，土壤酶活性随着土壤重金属离子含量的增加而降低。在微生物研究方面也有很多报道。滕应等[9]的研究表明，浙江铅锌银矿区土壤的微生物量明显偏低，可培养的细菌数量也显著降低。Suhadolic[11]等的研究表明，污染重的土壤中耐性细菌比轻污染的土壤中的耐性细菌数量多，土壤受锌、铅污染后，对固氮菌、纤维分解菌、木霉等菌类起抑制作用，但耐性较强的大豆根瘤菌和含脂刚螺菌比无污染和污染较轻的土壤多。在重金属污染的土壤中，土壤酶和微生物多样性的变化与其污染元素的含量存在极显著的相关性[13]。目前，我国对重金属污染的一些方面已进行了比较详细的研究，但重金属对土壤生态系统，尤其是土壤酶和微生物多样性及其群落结构的研究还比较少，很多机制和成因都没有得到充分的研究和应用，这在一定程度上使我们对重金属的生态风险评估制造了空白地带，不能为政府等有关部门的决策提供更详尽的科学依据。因此，加大对该领域的研究具有十分重要的理论和实践参考意义。 1．材料与方法 1.1 调查区环境污染概况 白银市位于甘肃省中部，海拔为1400—2100米，属陇中黄土高原丘陵区，常年干旱多风。该地区土地资源丰富，总土地面积1372 km2，但质量较低，近80%的土地为干旱荒漠草地，至2001年底耕地面积仅有约97.5 km2，占总土地面积的7.1%。水资源缺乏，植被稀少，覆盖率仅在12—20%之间，土壤类型主要为灰钙土。白银市是中国重要的有色金属基地之一，主要生产金、银、铜、铁、锌、铅、镍等金属是西北干旱内陆地区受重金属污染的典型地区，土壤具有长期的污灌历史该区工业污水和生活污水为当地农田灌溉的主要水源，且均是市中心的地表水，集中于白银市中心区的东大沟和西大沟流域内，全市污水排放量（1986）23.0955Mt/年，工业废水就占其中的68%，生活污水占32%，废水中含有镉、铅、铜、锌等20多种有害物质，浓度超出国家污水排放标准的数倍至数百倍，污灌区的土壤——作物系统已经明显受到了重金属的污染。 1.2土壤采样及处理 1.2.1 土样采集 以灌溉引用污水的污染源为调查点，在东大沟污灌区、清污混灌区、西北铜加工厂污灌区、回头老池污灌区处污水灌溉区，按照蛇形布点法均匀分布，在植物生长成熟期，随机垂直采取耕作层分别为0—20㎝、20—40㎝、40—0㎝的土体，采集土壤样品共24个。 1.2.2 土样处理 土壤压碎风干后，过20目（2㎜）塑料筛，然后