谷氨酸分子量及离解常数测定..docVIP

院系：医学检验系 班级：11检验本科1班 姓名：*** 谷氨酸分子量及解离常数测定 实验目的和要求 掌握酸度计的基本结构及操作； 掌握玻璃电极的基本结构、保存和使用； 掌握标准缓冲液在测定溶液酸度上的应用； 掌握电位滴定曲线的绘制及滴定终点的确定方法； 掌握电位滴定在测定物质物理常数上的应用。 实验原理 谷氨酸是分子内含两个羧基的二元酸，其分子式为C5H9O4N，分子量为147.13，其第二离解常数很小，采用一般滴定分析不容易观察到滴定突跃。 在谷氨酸与NaOH溶液的滴定过程中，随着NaOH的不断加入，溶液中的H+离子浓度不断变化，由此引起溶液的酸度值（电池的电动势）也不断变化，达到滴定化学计量点附近时，将产生H+浓度的突跃，从而可以根据溶液的酸度值变化确滴定第一化学计量点，以此为依据，可推算谷氨酸与NaOH溶液滴定的第二化学计量点（V终点2=2V终点1），并可根据反应摩尔比求出谷氨酸分子量。 谷氨酸在水中溶液中的离解平衡为： HA=HA+ H ……… HA=A+ H 从中可以看出，当滴定进行到化学计量点的一半（即0.5V终点）时，溶液中H2A= HA，代入，则K=[H+]，即pK=pH,因此只要确定出滴定终点，并在滴定曲线上找到0.5V终点所对应的pH值，就可以求出谷氨酸的第一级离解常数；同理，在滴定曲线上找到1.5V终点所对应的pH值，就可以求出谷氨酸的第二级离解常数；而根据谷氨酸与NaOH滴定至第一化学计量点时的反应摩尔比，可计算出谷氨酸的分子量。 实验仪器与试剂 pHS-3C型酸度计 2、NaOH标准溶液（0.1010mol/L） 谷氨酸标准溶液（6.9536mg/mL） 4、E-201-C pH复合电极一只 系列标准缓冲溶液（pH分别为6.86和4.00） 6、磁力搅拌器一台 7、25ml移液管1只 8、100ml玻璃烧杯1个 实验步骤 滴定前准备 将酸度计调节于测定“pH”位，按照仪器操作程序分别用系列标准溶液完成仪器各项调节。然后再冲洗干净pH复合电极，对谷氨酸标准溶液进行测定。 滴定过程中pH测定 取一个洁净干燥100ml玻璃烧杯，用移液管准确移25.00ml谷氨酸标准溶液。将烧杯置于磁力搅拌器上，开动搅拌器，插入pH复合电极，按照下表滴加NaOH标准溶液，按下pHS-3C型酸度计度数按钮，读取不同滴定体积时所对应的pH值。 NaOH标准溶液体积读数（ml） 0.00 0.50 1.00 1.50 2.00 2.50 3.00 pH 3.08 3.14 3.29 3.39 3.47 3.56 3.62 NaOH标准溶液体积读数（ml） 3.50 4.00 4.50 5.00 5.50 6.00 6.50 pH 3.72 3.78 3.83 3.94 4.02 4.13 4.20 NaOH标准溶液体积读数（ml） 7.00 7.50 8.00 8.50 9.00 9.50 10.00 pH 4.28 4.36 4.45 4.55 4.67 4.78 4.91 NaOH标准溶液体积读数（ml） 10.50 11.00 11.50 12.00 12.50 13.00 13.50 pH 5.09 5.34 5.94 8.06 8.64 8.91 8.10 NaOH标准溶液体积读数（ml） 14.00 14.50 15.00 15.50 16.00 16.50 17.00 pH 9.23 9.35 9.45 9.54 9.63 9.70 9.78 NaOH标准溶液体积读数（ml） 17.50 18.00 18.50 19.00 19.50 20.00 20.50 pH 9.85 9.92 9.99 10.06 10.13 10.20 10.28 NaOH标准溶液体积读数（ml） 21.00 21.50 22.00 22.50 23.00 23.50 24.00 pH 10.37 10.46 10.56 10.67 10.79 10.95 11.11 NaOH标准溶液体积读数（ml） 24.50 25.00 25.50 26.00 26.50 27.00 27.50 pH 11.27 11.44 11.58 11.70 11.80 11.86 11.94 实验数据处理 滴定曲线绘制 以测定的pH值为纵坐标，滴加的NaOH标准溶液体积为横坐标制图，绘制滴定曲线。 采用作图法求出滴定终点 在绘制的滴定曲线上，通过滴定曲线的上、下两个拐点处画出两条为45°线的切线