通痹液分子透入对实验性椎管内瘢痕羟脯氨酸含量的影响.docVIP

通痹液分子透入对实验性椎管内瘢痕羟脯氨酸含量的影响 【关键词】 通痹液；,,椎板切除术；,,硬膜外瘢痕增生；,,羟脯氨酸 　　摘要：目的通过动物实验观察和评价通痹液分子透入对硬膜外瘢痕羟脯氨酸含量的影响，并初步探讨其作用机理。方法45只大白兔切除L5椎板后造成1.2 cm×0.5 cm硬脊膜裸露区，随机分为3组：空白组（BC组）不作任何治疗，对照组（SC组）滤纸浸透0.9%氯化钠注射液后，行低频脉冲治疗，实验组（TB组）滤纸浸透通痹液后，行低频脉冲治疗。术后3、5、8周进行瘢痕组织行羟脯氨酸含量测定。结果第3周各组羟脯氨酸含量差别无显著性差异（Pgt;0.05），第5周BC组羟脯氨酸含量高于SC、TB组（Plt;0.05），第8周TB组羟脯氨酸含量低于BC、SC组（Plt;0.01）。SC、BC组3个时相羟脯氨酸含量呈显著增加趋势（Plt;0.05），TB组羟脯氨酸含量也呈增高趋势，第 8 周羟脯氨酸的含量与第 3 周比较有统计学意义（ Plt;0.05 ）。结论通痹液分子透入通过药物分子和低频电脉冲的综合作用，能减少瘢痕生成，抑制胶原纤维的形成。 　　关键词：通痹液； 椎板切除术； 硬膜外瘢痕增生； 羟脯氨酸 　　硬膜外瘢痕增生是引起腰椎手术失败综合征（failed back surgery syndrome，FBSS）的一个常见的重要原因。一般认为，血肿和炎性渗出［1，2］是导致硬膜外瘢痕增生的重要因素。以活血祛淤、利水通络立法，用经验方通痹液通过分子透入预防FBSS取得较好的临床效果［3］，为探讨其作用机理，建立实验性椎管内瘢痕形成模型，观察其对羟脯氨酸含量的影响。 　　1 材料 　　1.1 材料 　　1.1.1 动物的选择 普通级健康成年大耳白兔45只，体重2.5～3.0 kg，雄性。由湖南中医学院实验动物中心提供。 　　1.2 药物的制备通痹液 由桃仁、红花、丹参、防己、黄芪等10味中药组成，按等份加入多能提取罐中水提3次，然后低温减压浓缩至5%浓度。药液由湖南中医学院第一附属医院制剂室制备。 　　1.3 仪器与试剂DZYB型电脑骨质增生治疗仪（北京无线电仪器厂生产）；751型紫外可见光分光光度计（上海分析仪器厂）；分析天平（北京光学仪器厂）；羟脯氨酸测试盒（南京建成生物工程研究所一分所提供，批。 　　2 方法 　　2.1 椎板缺损模型的制作将全部45只家兔，按孙康等［4］的方法制作成椎板缺损模型。以横突和棘突明显突出的L7椎为参照，确定L5棘突，以L5棘突为中心，剪除面积为4.0 cm×4.0 cm的兔毛，用质量分数25%乌拉坦，按1.0 g/kg剂量行兔耳缘静脉麻醉，将兔固定于手术台上，局部用络合碘消毒，铺无菌巾。以L5棘突为中心，取兔背部正中切口，长约3 cm，向两侧剥离竖脊肌，暴露并咬除L5棘突及椎板，造成1.2 cm×0.5 cm椎板缺损，切除其下的黄韧带，清除硬膜外脂肪，完全裸露硬脊膜，清除碎骨片，彻底止血，冲洗切口，逐层缝合切口，无菌纱布包扎。所有动物术后3 d内每天肌注青霉素钠盐2次，40万u/次，伤口换药1次，5 d后拆线。 　　2.2 动物的分组造模成功后，将45只家兔称重，按体重大小排序编号，查随机数目表将45只家兔随机分为空白对照组（blank control group, BC组）、低频电对照组（0.9%sodium chloride group, SC组）、实验组（TongBi solution group, TB组），每组15只。所有动物在同一条件下单笼喂养，笼上编号。 　　2.3 治疗方法 　　2.3.1 BC组 术后不作治疗。 　　2.3.2 SC组 低频脉冲治疗，2.0 cm×2.0 cm滤纸加0.9%氯化钠注射液2 ml，垫在切口两侧并置导入，在运动阈下进行治疗，造模后第3天开始，1次/d，25 min/次。 　　2.3.3 TB组 低频脉冲治疗，2.0 cm×2.0 cm滤纸加通痹液2 ml，垫在切口两侧并置导入，在运动阈下进行治疗，造模后第3天开始，1次/d，25 min/次。 　　2.4 观察方法 　　2.4.1 观察时相点的确定根据预实验观察结果及相关文献资料，于术后3，5，8周3个时相点对BC，SC，TB 3组进行分批处死，每时相点各组处死5只动物。 　　2.4.2 标本的采集与预制 空气栓塞法处死动物后，立即完整取出手术段脊椎，从侧方切开竖脊肌，取椎板切除部位硬脊膜后部的瘢痕组织，大小约为0.2 cm×0.2 cm×0.1 cm，漂洗后置于100℃恒温箱中烘干，称干重。作羟脯氨酸含量测定。 　　2.4.3 瘢痕组织羟脯氨酸含量测定 烘干后的瘢痕组织按干粉10