2015蛋白质工程开题报告.pptVIP

例如：某多肽链的一段氨基酸的序列是 ···—甲硫氨酸—色氨酸—苯丙氨酸—色氨酸—··· （部分氨基酸的密码子是：甲硫氨酸—AUG，色氨酸—UGG，苯丙氨酸—UUU/UUC) 怎样得出决定这一段肽链的脱氧核苷酸序列？请把相应的碱基序列写出来。 改造酶的结构，有目的地提高酶的热稳定性 三、蛋白质工程的进展和前景 1、前景诱人：如用此技术制成的 ，具有 、耗电少和 的特点。 2、难度很大：主要是目前科学家对大多数蛋白质的 的了解还很不够。 * 学习目标： 简述蛋白质工程的基本原理 举例说出蛋白质工程的应用和发展 1、基因工程的应用 （1）基因工程的实质：将一种生物的 转移到另一种生物体内，使后者产生本不能产生的 ，进而表现出新的 。 （2）基因工程的不足：在原则上只能生产自然界已存在的 。 2、天然蛋白质的不足 天然蛋白质是生物在长期进化过程中形成的，它们的结构和功能符合特定物种生存的需要，却不一定完全符合人类生产和生活的需要。 3、蛋白质工程的目的 生产符合人类生产和生活的需要的 。 思考：蛋白质工程崛起的缘由？？ 基因 蛋白质 性状 蛋白质 蛋白质 例如：改造干扰素和提高玉米赖氨酸含量 玉米中赖氨酸含量比较低 玉米中赖氨酸含量可提高数倍 天然蛋白质的合成过程 一切生命活动的体现者—— ？ 蛋白质 一、蛋白质工程的概念和原理 1、概念 2、基本原理 3、改造类型 P30 前提条件： 操作对象： 目的： 了解蛋白质的结构和功能 定向改造或制造蛋白质 蛋白质工程的概念 是指通过物理化学与生物化学等技术了解蛋白质的结构和功能，并借助计算机辅助设计、基因定点诱变和重组DNA技术改造基因，以定向改造天然蛋白质，甚至创造自然界不存在的蛋白质的技术。 基因 ———实施蛋白质工程的前提条件 了解蛋白质的结构和功能的关系 X射线衍射仪 核磁共振仪器 蛋白质结构 测定 测定 结构分析 功能分析 结构预测 与设计 基因工程 蛋白质纯化 不断完善 蛋白质工程基本原理示意图 关键技术 蛋白质工程的流程图 基因 DNA 氨基酸序列多肽链 蛋白质 三维结构 预期功能 生物功能 mRNA 转录 翻译 折叠 DNA合成 分子设计 中心法则(天然蛋白质合成途径） 注意：蛋白质工程的基本途径与中心法则是： ？ 相反 TAC ACC AAA ACC 或 TAC ACC AAG ACC ATG TGG TTT TGG ATG TGG TTC TGG 讨论： 确定目的基因的碱基序列后，怎样才能合成或改造目的基因（DNA）？ 　　根据人类的需要改造它，通过人工合成的方法或从基因库中获取。 对蛋白质进行改造 大改 中改 小改 设计、制造出自然界不存在的 全新蛋白质 替代某一个肽段或一个 特定的结构域 改造某个活性单位的一个或几 个氨基酸残基（定点诱变技术） 核心技术 PCR 诱变引物 定向突变基因 受体细胞 目的蛋白质 基因工程 表达 定点诱变技术 基因定点诱变技术的示意图 思考：基因定点诱变技术与基因突变的比较 方向 手段 场所 不同点 结果 发生的过程 相同点 基因突变 基因定点诱变 比较 DNA复制过程中 产生新基因，从而产生新性状 生物体外 生物体内 定向改造 不定向性 PCR技术 物理化学方法 过程 结果 联系 目标 操作对象 操作起点 蛋白质工程 基因工程 项目 目的基因 预期的蛋白质功能 基因 基因 获取目的基因→ 构建表达载体→ 导入受体细胞→ 目的基因的检测与表达 预期蛋白质功能→ 设计蛋白质结构→ 推测氨基酸序列→ 推测核苷酸序列→ 合成DNA →表达出蛋白质 定向改造生物的遗传特性，获得人类所需的生物类型或生物产品 定向改造或生产人类所需的蛋白质 生产自然界中已有的蛋白质 蛋白质工程是在基因工程的基础上,延伸出来的第二代基因工程。因为对现有蛋白质的改造或制造新的蛋白质，必须通过基因的修饰或基因的合成。 生产自然界没有的蛋白质 异亮氨酸 苏氨酸 二、蛋白质工程的应用 天门冬酰胺 天门冬酰胺 酵母菌 丙糖磷酸异构酶 热稳定性提高50％ 工业生产上 提高酶的稳定性方法： ①改变氨基酸（如酵母菌的丙糖磷酸异构酶） 天门冬酰胺—转变为—苏氨酸 天门冬酰胺—转变为—异亮氨酸 稳定性提高50% ②引入二硫键 鼠抗体 人抗体 恒定区 恒定区 可变区 可变区 嵌合抗体 对人体的不良反应减少 制药领域上 制药领域 例2 纤维蛋白溶解酶原激活因子（t-PA） 保证血液