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第3章 酶的制备及应用
?“酶的应用”包括“研究酶的存在和简单制作方法”、“尝试利用酶活力测定的一般原理和方法”、“探讨酶在食品制造中的应用”、“探讨酶在洗涤等方面的应用”、“尝试制备和应用固相化酶”等五项具体内容标准。在人教版高中生物教科书中,这些具体内容标准体现在“果胶酶在果汁生产中的作用”、“探讨加酶洗衣粉的洗涤效果”和“ 酵母细胞的固定化”三个课题内容及具体要求方面。下面谈谈对“酶的应用”专题的教学组织。
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1. 探讨果胶酶在果汁生产中的作用
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1.1 探究课题的确定?? 果胶酶是多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶和果胶酯酶等一系列酶的总称,其作用是分解细胞壁及胞间层的半糖醛酸高分子聚合物,将果胶等物质分解成可溶性的半乳糖醛酸等物质,使浑浊的果汁变得澄清,增加果汁的稳定性,提高果汁的品质。影响果胶酶活性的常见因素是温度和pH,因此,实验程序应起始于引导学生提出一个适于他们探究的问题。一般情况下,可将学生分成两大组,一组学生探究温度对果胶酶活性的影响,别一组探究pH对果胶酶活性的影响。在此基础上,可继续探究在适宜的温度和pH条件下,果胶酶的适宜用量,最后计算将水果通过果胶酶的作用形成果汁饮料的价值。
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1.2?学生分组设计实验方案?在必修模块的学习过程中,学生曾参与“影响酶活性的条件”一组探究实验。本实验的原理和操作基本步骤相对容易些,可让学生在阅读教材的基础上,确定下列实验流程及操作:
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在此基础上,要求学生根据具体课题讨论实验设计中的变量,并提出相应问题供学生思考和讨论:(1)本实验的自变量是什么?因变量是什么?有哪些无关变量?(2)自变量如何进行定量控制?(3)因变量如何进行有效的检测?(4)怎样严格控制无关变量?
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下表是以不同温度对果胶酶活性探讨的分析,可通过表中的部分内容引导学生讨论。
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试管编号 1号 2号 3号 4号 无关变量 ?? 50mL苹果汁 无关变量 ?5mL质量分数为2%的果胶酶 自变量 20℃恒温水浴 40℃恒温水浴 60℃恒温水浴 80℃恒温水浴 无关变量 分开保温及保温时间等 因变量检测 生果汁产量(果胶酶活性检测) ?
1.3?操作注意事项 ?果胶酶的催化效果远不如过氧化氢酶明显,教师最好提前配制果胶酶溶液,适当增加果胶酶浓度,以缩短实验时间。果胶酶价格较贵,酶液浓度过高会增加实验成本。果胶酶是利用微生物发酵生产的,适宜温度比较宽泛,实验设置的温度梯度可相应间隔大一些,可采取20℃、30℃、50℃、60℃、70℃等温度梯度。设置pH梯度时,可参考下述中的右图。?
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测定酶活力的方法很多,除用单位时间内的果汁产量来反映酶活性外,比较科学的方法是用分光光度法测定,上图就是依据测定单位时间内果汁(橘子)的透光率而获得的酶活力数据,分光光度法不仅可以获得准确的数据,而且还可以减少实验的时间。
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?2?探讨加酶洗衣粉的洗涤效果
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?加酶洗衣粉中一般添加了蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶等酶制剂,可以有效地清除奶渍、油渍、血渍和果汁渍等不易清洗的污渍。该实验可分成几个小的探讨课题:一是探讨普通洗衣粉和加酶洗衣粉的洗涤效果,二是探讨温度对加酶洗衣粉洗涤效果的影响,三是探讨加酶洗衣粉对不同污渍的洗涤效果。三个课题可分组进行。
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?进行实验设计时要解决好控制变量的问题,可以启发学生讨论下列思考性问题:⑴检验洗涤效果最好采用机洗、手洗,还是人工模拟洗衣机洗?为什么(人工模拟洗衣机洗。这是因为洗衣机太大,而污染太小,无法控制水量等无关变量;手洗时无法控制手的搓洗的力度和次数等)? ⑵用人工模拟洗衣机洗时需要考虑哪些因素(搅拌的方式、力度和时间需要保持一致等)?⑶水温如何控制(水浴)?⑷选择衣服还是布料为实验材料?对实验材料的质地有何要求?为什么(布料;布料应大小一致,相对较小,而且为白色的棉布类;白色的棉布易吸附污渍,显色明显,洗后容易判断效果)?⑸水的用量和洗衣粉的用量怎样确定(一般采用500 mL的水,洗衣粉的用量为1 g或1.5 g)?⑹如何判断洗涤效果(比较污渍的大小和深浅)? 等等。
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探究温度对加酶洗衣粉的影响时,学生往往会不加思索地设计从0 ℃开始到100 ℃的温度梯度,这时应提醒学生思考确定温度范围应考虑季节性变温,采用5 ℃、10 ℃(相当于冬季,下同)、15 ℃、20 ℃、25 ℃(春季和秋季)、30 ℃、35 ℃(夏季),这7个水温值比较符合实际。一般来说,北方学生可探讨冬季(低温)时使用加酶洗衣粉的效果,南方学生探讨夏季(高温)时使用加酶洗衣粉的效果。
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3?酵母细胞的固定化
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3.1?重视实验中的认知成分
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在生物技术实践活动中,经常涉及技术原理和实践意义等内容,实验教学中要重视这些认知成分。自1969年世界上首次成功地将氨基酰化酶固定化用于
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