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酶工程
第一节 第一节概概述述
酶工程是在发酵工程(微生物工程)基 础上发展起来,它与发酵工程的联系极为 密切。酶工程是生物工程的重要组成部分, 与基因工程、细胞工程、发酵工程相互依 存、相互促进。
一、酶的定义与性质
酶(enzyme):是由生物体内活细胞产生的一 种生物催化剂(biocatalyst) 。
按化学组成分成蛋白质类酶和核酸类酶。
二、酶的分类与命名
1 习惯命名法( 1961年以前):
根捤作用底物,底物名 + “酶”:如淀粉酶、蛋白酶等;
根捤反应性质,反应类型 + “酶”:氧化酶
根捤作用底物和反应性质,如丙酮酸脱羧酶、 DNA聚合酶等;
根捤酶的来源或其它特点,如胃蛋白酶、含铁酶等;
? 存在问题:
缺乏科学系统性,易产生“一酶多名”或“一名多酶”问题。 如分解淀粉的酶,若按这种命名法则有三种名称,如淀粉酶、 淀粉水解酶和细菌淀粉酶。
2 系统命名法与分类
1.系统命名法
根捤国际生化协会酶命名委员会的觃定,每一个酶都用四个 打点隔开的数字编号,编号前冠以EC(酶学委员会缩写), 四个数字依次表示:
第一个数为大类,按酶促反应性质分的六大类。 第二个数为亚类,按底物中被作用基团或键的性质分。 第三个数为亚亚类,迚一步精确底物的性质。 第四个数为亚亚类中的顺序号
乙醇脱氢酶的编码是: EC1.1.1.1
第一个“1”—— 第1大类,即氧化还原酶类; 第二个“1”—— 第1亚类,供氢体为CHOH; 第三个“1”—— 第1亚亚类,受氢体为NAD+; 第四个“1”—— 在亚亚类中的顺序号。
2.分类
(1)氧化-还原酶 Oxidoreductase
氧化-还原酶催化氧化-还原反应。
主要包括脱氢酶(Dehydrogenase)和氧化酶 (Oxidase)等。
例如,乳酸(Lactate)脱氢酶催化乳酸的脱氢反应。
CH3 CHCOOH NAD+ CH3 CCOOH NADH H+ OH O (2)转移酶 Transferase
转移酶催化基团转移反应,即将一个底物分子的 基团或原子转移到另一个底物的分子上。
例如, 谷丙转氨酶催化的氨基转移反应。
CH3CHCOOH HOOCCH2CH2CCOOH NH2 O CH3CCOOH HOOCCH2CH2CHCOOH O NH2
(3)水解酶 Hydrolase
水解酶催化底物的加水分解反应。
主要包括淀粉酶、蛋白酶、核酸酶及脂酶等。
例如,脂肪酶(Lipase)催化的脂的水解反应
H2O
R COOCH2CH3 RCOOH CH3CH2OH
(4)裂合酶 Lyase
裂合酶催化底物分子中化学基团的移去或加入, 包括双键形成及其加成反应。
主要包括醛缩酶、水化酶及脱氨酶等。
例如, 延胡索酸水合酶催化的反应。
HOOCCH=CHCOOH H2O HOOCCH2CHCOOH
OH
(5)异构酶 Isomerase
异构酶催化各种同分异构体的相互转化,即底物 分子内基团或原子的重排过程。
例如,6-磷酸葡萄糖异构酶催化的反应。
(6)连接酶 Ligase or Synthetase
连接酶,又称为合成酶,能够催化C-C、C-O、 C-N 以及C-S 键的形成反应。这类反应必须与 ATP分解反应相互偶联。
A + B + ATP + H-O-H ===A ? B + ADP +Pi
例如,丙酮酸羧化酶催化的反应
丙酮酸+ CO2+ATP +H2O ? 草酰乙酸+ADP+Pi
三、酶的结构与特性
(一)
?大多数酶是蛋
结论:酶是蛋白质
酶可被蛋白酶和酸或碱水解,水解产物是氨基酸; 凡是能使蛋白质变性的因素都能使酶变性失活; 酶是两性电解质; 酶具有蛋白质一样胶体性质; 酶也有蛋白质所有的化学呈色反应。
1926年美国Sumner 脲酶的结晶,幵指出酶是蛋白质。
1936年:Northrop and Kunitz制备胃蛋
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