2017整理动物细胞工程课时1.pptVIP

动物细胞工程 在治疗烧伤病人时，通常采用的方法是取烧伤病人健康皮肤进行自体移植。但对于一个大面积烧伤的病人来说，自体健康皮肤非常有限，使用他人皮肤来源不足，而且会产生免疫排斥反应。那么，怎么才能获得大量的自体健康皮肤呢？ 动物细胞融合 单克隆抗体技术 动物细胞核移植 动物细胞培养 动物细胞工程常用技术 其它动物细胞工程的基础  从动物机体中取出相关的 ，将它分散成 ，然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞 。 一、动物细胞培养 1、概念： 动物胚胎或 幼龄动物的组织、器官 如：肾、肺等 细胞生命力旺盛，分裂能力强 组织 单个细胞 生长和增殖 原理： 成块的组织细胞靠在一 起,彼此限制了细胞的 生长和增殖，也不利于 细胞营养物质的吸收 和代谢废物的排出。 细胞增殖 注意关键词: 细胞贴壁 接触抑制 原代培养 传代培养 2、过程： 酶处理 剪碎 单个细胞 制成_________ 转入培养瓶内培养 50代细胞 无限传代 分瓶 细胞贴壁 接触抑制 特点： 遗传物质不改变 传代10-50代左右：增长缓慢以至于完全停止，部分细胞核型可能发生变化（遗传物质可能改变） 50代后继续传代培养：少部分细胞突变，遗传物质已经改变，细胞获得不死性，等同于癌细胞 胰蛋白酶处理 原代培养( 代) 传代培养 10 胰蛋白酶的作用是什么呢？由此可说明细胞间的物质是什么成份？能够用胃蛋白酶代替胰蛋白酶吗？为什么？ 胰蛋白酶水解蛋白质。细胞间的成份是蛋白质。 不能，因为两者的最适pH不同。 的组织、器官 动物胚胎或幼龄动物 胰蛋白酶或胶原蛋白 加入培养液 细胞株 细胞系 细胞悬液 取材： （1）、无菌、无毒的环境 （2）、营养 （3）、温度和PH （4）、气体环境 3、动物细胞培养条件 4.动物细胞培养技术的应用: (1）.生产生物制品 如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体 （2）.应用于基因工程 主要用于作为受体细胞 （3）.检测有毒物质，判断某种物质的毒性 （4).细胞的生理、药理、病理研究 如用于筛选抗癌药物 能否用类似植物组织培养的方法获得克隆动物吗？为什么？ 目前不能。 因为动物细胞的全能性随着分化程度的提高逐渐受到限制。 目前，用动物体细胞克隆的动物，实际上是通过核移植来实现的。 二、动物体细胞核移植技术和克隆动物 动物核移植是将动物的一个细胞的细胞核,移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中.使其重组并发育成一个新的胚胎,这个新的胚胎最终发育为动物个体。（克隆动物） 3、分类： 胚胎核移植、体细胞核移植。 胚胎细胞分化程度低，恢复其全能性相对容易。 动物体细胞分化程度高，恢复其全能性十分困难 2、原理： 动物细胞核的全能性 1、定义： 4、体细胞核移植的过程（以高产奶牛为例） 体细胞 培养 取出核 甲牛 乙牛 MⅡ卵母细胞 去除核 去核卵母细胞 重组 卵细胞 核植入 细胞分裂、发育 早期胚胎 代孕母牛丙 移植 体细胞群 克隆牛 细胞核移植 胚胎移植 物理或化学方法激活 显微操 作法 （供体） （受体） ①.体积大，易操作 ②.含有促使细胞核表达全能性的物质和营养条件 电脉冲、钙离子载体、乙醇、蛋白酶抑制剂 分娩 妊娠 问题 利用体细胞核移植方法生产的克隆动物，是对体细胞供体动物进行了100%的复制吗？为什么？ 克隆动物DNA主要来自于供体细胞核，但其核外还有少量的DNA，即线粒体中的DNA是来自于受体卵母细胞。所以用体细胞核移植方法克隆的动物并不是供核动物完全相同的复制。 5.体细胞核移植技术的应用前景： 1.加速家畜遗传改良的进程 2.保护濒危物种 3. 生产医用蛋白质及组织器官的移植 4.了解胚胎发育和衰老过程；追踪研究疾病的发展过程和治疗疾病 6、体细胞核移植技术存在的问题 P173 （1）成功率非常低 （2）绝大多数克隆动物存在健康问题并表现出遗传和生理缺陷。 （3）克隆动物食品的安全性问题。 强调一：细胞贴壁过程 ■定义： ■培养瓶或培养皿壁要求： 内表面光滑、无毒、无菌、易 于贴附 在培养瓶悬液中分散的细胞很快就 贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。 ■当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的