2017整理动物细胞融合与单克隆抗体终.ppt

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2017整理动物细胞融合与单克隆抗体终

植物体细胞杂交过程示意图 5、动物细胞融合的应用 1、动物细胞融合特有的诱导因子是灭活的病毒( ) 2、杂交细胞具有原来两个或多个细胞的遗传信息 ( ) 3、动物细胞融合的应用中最重要的是培育新物种 ( ) 4、动物细胞融合克服远缘杂交不亲和的障碍( ) 5、动物细胞融合与植物体细胞杂交所采用的原理完全相同 ( ) 6、动物细胞融合和植物原生质体融合决定于细胞膜的流动 ( ) 单克隆抗体的应用 通常采用有限稀释克隆细胞的方法,将杂交瘤细胞多倍稀释,接种在多孔细胞培养板(见书P47)上培养,使每孔细胞不超过一个,再由这些单细胞克隆生长,然后检测各孔上清液中细胞分泌的抗体,那些上清液可与特定抗原结合的培养孔为阳性孔。最终选出分泌预定特异性抗体的杂交细胞株进行扩大培养。 筛选出能分泌所需抗体的杂交瘤细胞 小资料2: 阳性孔 动植物细胞结构的异同比较 融合的方法和原理与原生质体融合相同吗? 读下面一段资料,找出单克隆抗体的概念 人们发现,在动物发生免疫反应的过程中,体内的B细胞可以产生多达百万种以上的特异性抗体,但是每个B细胞只分泌一种化学性质单一、特异性强的抗体。要想获得大量的单一抗体,必须用单个B细胞进行大量增殖,即克隆。 单克隆抗体的概念 单克隆抗体:单个B细胞克隆产生的化学性质单一、特异性强的抗体 (1)若A细胞是小鼠骨髓瘤细胞,则B细胞是取自小鼠体内的 细胞,从小鼠体内提取分离该细胞之前,应给小鼠注射_____________类物质。 (2)d过程是一个_____________过程,该过程的进行常用_____________或_____________的诱导。 (3)假设仅考虑某两个细胞的融合,则可形成 种类型的C细胞,因此需用__________培养基筛选出D细胞用于培养,D细胞的名称是 ,其特点是_________________________________________。 效应B 抗原 细胞融合 聚乙二醇 灭活的病毒  选择性   3 既能无限增殖又能产生特异性抗体 杂交瘤细胞 * * 2002年12月30日, 两场筹备了10年的“太空婚礼”首次在神舟四号飞船上举行,植物细胞“新人”—黄花烟草和革新一号烟草叶肉细胞原生质体,动物细胞“新人”是小鼠B淋巴细胞和骨髓瘤细胞,两批新人同时在 “产房”—电融合仪内孕育新生命。 “太空婚礼” 这两场“太空婚礼”实质是哪两项细胞工程技术 植物体细胞杂交技术 动物细胞融合技术 (1) (1) (2) (3) (4) (5) 再生细胞壁 脱分化 再分化 去除细胞壁 诱导 融合 优点:克服远缘杂交的不亲和的障碍 有些细胞的融合是正常的生命活动。 如精子与卵细胞的结合。 阅读课本P52及识图2-23,并思考下列问题: 诱导的方法? 融合后细胞的类型? 概念?原理? 也称细胞杂交 两个或多个细胞 一个细胞 A细胞 B细胞 人工诱导 杂交细胞 动物细胞融合 1、概念 a.杂交细胞 b.单核细胞 c.具有原来两个或多个细胞的遗传信息 3、方法 与原生质体融合方法类似, 灭活的病毒、PEG、电激等 2、原理 细胞膜的流动性 AA、BB、AB 融合后细胞的类型: 为什么灭活的病毒能作诱导剂? 仙台病毒 紫外线 灭活 丧失感染活性(不感染细胞) 保留融合活性(诱导细胞融合) ①什么是病毒的灭活? ②灭活病毒诱导细胞融合的原理? 使细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布,细胞膜打开,细胞发生融合 灭活的病毒颗粒黏附于细胞表面 细胞膜被病毒颗粒穿通 细胞膜连接 细胞融合,形成杂交细胞 (细胞膜具有一定的流动性) 细胞核 病毒颗粒 细胞核 突破有性杂交方法的局限, 使远缘杂交成为可能 为制造单克隆抗体开辟了新途径(最有价值的应用) 4、优点 鼠—鸡、鼠—兔、鼠—猴、人—鼠、人—兔、 人—鸡、人—蛙、酵母菌—鸡 、人—胡萝卜等 用 使细胞分散后诱导细胞融合 去除 后诱导原生质体融合 主要用于制备 . 获得 植株 用途 物理、化学方法、还有 .

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