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课题目标 说明植物组织培养的基本原理。 学习植物组织培养的基本技术,进行菊花或其他植物的组织培养。 课题重点与难点 课题重点:植物组织培养过程中使用的无菌技术。 课题难点:植物组织培养过程中使用的无菌技术。 快速繁殖。 生产药物、食品添加剂、香料、色素、和杀虫剂等。例如:紫杉醇,生物碱、紫草素等。 转基因植物的培育。 培养无病毒植株。 三、植物组织培养的基本过程 什么叫脱(去)分化、再分化? 愈伤组织的细胞有什么特点? 如何控制细胞的脱分化与去分化? 四、影响植物组织培养的因素: 3、不同植物激素使用顺序和使用量 3、不同植物激素使用顺序和使用量 结果分析与评价 (一)对接种操作中污染情况的分析 (二)是否完成了对植物组织的脱分化和再分化 (三)是否进行了统计、对照与记录 (四)生根苗的移栽是否合格 课题延伸(略) 练习 1.答:植物组织培养所利用的植物材料体积小、抗性差,对培养条件的要求较高。用于植物组织培养的培养基同样适合于某些微生物的生长,如一些细菌、真菌等的生长。而培养物一旦受到微生物的污染,就会导致实验前功尽弃,因此要进行严格的无菌操作。 2.答:外植体的生理状态是成功进行组织培养的重要条件之一。生长旺盛的嫩枝生理状况好,容易诱导脱分化和再分化。 一、植物组织培养的意义: 二、细胞的分化与全能性 细胞分化:个体发育中,细胞在形态、结构和生理功能上出现稳定性差异的过程。 细胞全能性:具有某种生物全套遗传信息的任何一个活细胞,都具有发育成完整个体的能力,即每个生物细胞都具有全能性。 1、植物学家将胡萝卜的韧皮部细胞分离出来,将单个细胞放在特定的培养基中培养,获得了许多完整的植株,这些植株的特点是( ) A.彼此性状极为相似 B.都是单倍体植株 C.植株的变异频率较高 D.都是纯合体植株 2、根据分裂潜能,干细胞可分为全能干细胞(可发育成完整的个体)、多能干细胞(可发育成多种组织和器官)和专能干细胞(发育成专门的组织和器官),则这些细胞在个体发育中的分化顺序是( ) A.全能——专能——多能 B.全能——多能——专能 C.多能——全能——专能 D.专能——全能——多能 练 习: 思考题: 1、外植体的选取 不同植物的组织培养难度不同 同一种植物的不同组织培养难度不同 2、培养基的配制(MS培养基) 大量元素:C、H、O、N、P、K、Ca、Mg、S 微量元素:B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co 有机物:甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等 植物激素:生长素、细胞分裂素、赤霉素等 分化频率提高 同时使用 细胞既分裂也分化 先细胞分裂素, 后生长素 有利于分裂但不分化 先生长素, 后细胞分裂素 实验结果 使用顺序 促进愈伤组织生长 比值适中 促芽分化, 抑根形成 比值低时 促根分化, 抑芽形成 比值高时 结果 生长素细胞分裂素比值 促进愈伤组织生长 比值适中 促芽分化, 抑根形成 比值低时 促根分化, 抑芽形成 比值高时 结果 生长素细胞分裂素比值 4、消毒 在培养的整个过程中,都需要是一个无菌环境原因: 5、pH、温度、光照 菊花: pH=5.8 温度控制在18—22℃ 每日光照12h 制备MS固体培养基 外植体消毒 接种 培 养 栽 培 四、实验操作 移 栽 冲洗—酒精—无菌水冲洗—氯化汞—无菌水冲洗至少三次之上 此时的组织或细胞为离体的,即细胞所生活的环境为液体有机物营养环境,而不是能体现其整个植物体的光能自养 在培养过程中,是脱分化、再分化的过程,随着芽和根的形成,就具有了自养的能力,是由细胞到一个个体的演变过程 1、高等植物是光能自养型生物,为什么在植物组织培养过程中还需要提供有机物培养基? 2、培养过程中为什么需要进行光照 思 考 1、培养基的灭菌(高压蒸汽灭菌) 2、外植体的消毒(酒精、氯化汞) 3、接种的无菌操作(酒精、酒精灯——灼烧) 4、无菌箱中的培养; 5、移栽到消过毒的环境中生存一段时间。 3、在整个操作过程中,是如何来实现无菌环境的? * 萧县郝集中学
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