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作者姓名：张丽萍 专业名称：动物营养与饲料科学 指导教师：王康宁 论文题目：不同品种猪肠道微生物与体脂、ANGPTL4基因关系的研究 作者简介： 摘 要 本研究以实时荧光定量PCR和原代培养猪回肠上皮细胞技术，研究了不同品种猪肠道微生物与体脂、ANGPTL4基因的关系。研究包括六个试验。 试验一：猪拟杆菌属和普雷沃氏菌属16SrDNATagMan-PCR实时荧光定量PCR方法建立 通过对猪肠道30种细菌的16SrDNA序列进行比对分析，设计拟杆菌属—普雷沃氏菌属荧光定量的特异引物；以多形拟杆菌菌株（CDC1404-A）基因组的DNA为模板，用常规PCR引物扩增16SrDNA靶片断，将PCR产物纯化后作为DNA标准品，按1.19×102－1.19×106copies/ul5个稀释梯度的标准品作模板，建立定量标准曲线；用TaqMan探针建立25ul反映体系，对不同浓度的多形拟杆菌DNA样品进行检测，检测探针的敏感性；并以乳酸杆菌、大肠杆菌和双歧杆菌的基因组DNA模板作阴性对照，检测拟杆菌属—普雷沃氏菌属的特异性。结果表明： 1）通过克隆测序，得到了拟杆菌属和普雷沃氏菌属细菌的16SrDNA部分共有片段序列，该序列与Genbank中发表的多形拟杆菌（基因序列号为M58763）和中间普雷沃菌AY323522）16SrDNA基因序列相比，该片段为多形拟杆菌的792～1003普雷沃菌位碱基的片