实验一人基因组DNA的提取.docVIP

第二篇　细胞的遗传物质 　 第一章　细胞内核酸的提取 人类基因组计划的完成以及后基因组学研究的不断深入，标志着现代医学的发展已逐步进入基因组医学的时代。分子医学核酸是遗传信息以及基因表达的物质基础是重要的生物信息分子,是分子生物学研究的主要对象它与生命的正常活动，如种族遗传、生长等有密切联系它与生命的异常活动，如肿瘤的发生、放射损伤以及抗癌、抗病毒药物的作用机理也有密切的关系。因此，核酸是重点研究课题之一。核酸分为DNA和RNA两大类。的提取是分子生物学实验技术中基本的操作，　真核细胞基因组DNA的分离与纯化 DNA主要在细胞核内，核外也有少量称为核外基因的线粒体DNA等。真核细胞的DNA分子比原核生物的DNA分子大得多，并且以核蛋白体形式存在于细胞中真核细胞基因组DNA提取的主要步骤裂解和纯化两大步骤。裂解是使样品中的核酸游离在裂解体系中的过程，纯化则是去体系中的其它成分，如蛋白质、多糖、脂类及其它不需要的核酸（RNA）等生物大分子的过程。细胞破碎的手段常为超声波、组织匀浆、液氮破碎以及包埋组织的超薄切片等方法。为了获得大量完整的DNA，一般采用等温和的方法破碎细胞。裂解液都含有去污剂 (如 SDS、Triton X-100、NP-40、Tween 20 等) 和盐 (如 Tris、EDTA、NaCl 等)。去污剂是通过使蛋白质变性，破坏膜结构及与核酸相连接的蛋白质，从而实现