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HPLC-MS 技术 学生 一、HPLC-MS 技术概述 二、HPLC-MS 技术优势 三、HPLC-MS 技术应用 一、HPLC-MS技术概述 HPLC-MS技术即高效液相色谱-质谱联用技术，首先高效液相色谱是溶质在固定相和流动相之间进行的一种连续多次的交换过程，它借溶质在两相间分配系数、亲和力、吸附能力、离子交换或分子大小不同引起的排阻作用差别使不同溶质进行分离。 质谱法即物质分子的质量谱， 实际是分离和测定分子的质量、强度信息 的方法，并由此表示物质的成分与结构。质谱 分析可以得到化合物的分子质量、分子式及元素组成。 质谱原理：首先将样品中的分子电离，不同质量电子在电场或磁场中，将按其质量和所带的电荷比（质荷比）进行分离和排序，根据质荷比的大小和相对强度形成有规则的质谱，从而对物质进行结构鉴定和定量分析。 质谱仪组成 质谱仪须有进样系统、电离系统、 质量分析器和检测系统。 样品 进样系统 离子源 质量分析器 检测器 真空系统 真空系统 真空系统 信号处理器 读出器件 HPLC-MS技术 HPLC-MS是继GC-MS联用后又 一新兴的分离检测技术，近来发展 极为迅速。液质联用技术即利用液相色谱对物质进行分离，质谱进行物质定性的方法对物质进行分析。由于液相色谱的应用范围比较广泛，与质谱联用后，即可分析高沸点、大分子、强极性和热稳定性差的化合物。 液质联用仪 岛津LCMS-2020 美国力可公司 Citius HRT HPLC-MS技术始于20世纪70年代。 它主要由高效液相色谱仪、接口系统、 质量分析器、真空系统和计算机数据处理 系统组成。 HPLC是“高压—液相—分子”体系，而质谱是“高真空—气相—离子”体系。 液质联用是通过一个“接口”来实现的。这个接口就是将质谱仪的进样系统和电离源改进并与液相相连接。在接口处完成溶液的气化和样品分子的电离 。 接口基本原理 主要采用大气压电离(API)技术，API包括电喷雾电离（ESI）和大气压化学电离(APCI) 电喷雾（ESI）:溶液中样品流出毛细管喷口后，在雾化气(N2)和强电场(3～6kV)作用下，溶液迅速雾化并产生高电荷液滴。随着液滴的挥发，电场增强，离子向液滴表面移动并从表面挥发，产生单电荷或多电荷离子。 大气压化学电离(APCI):气态化学电离(CI)过程。溶剂或反应气在电晕针的作用下先带电，再转移给化合物形成离子。 ???? 大气压电离-电喷雾电离 雾化器组件是同轴套管 雾化气为N2 大气压化学电离 ?雾化 ?蒸发液滴 ?气相电离 APCI 电离过程 二、HPLC-MS 技术优势 HLPC?-?MS具有以下几个方面的优点： (1)?分析范围广，MS几乎可以检测所有的化合物，比较容易地解决了分析热不稳定、强极性、大分子化合物的难题； (2)?分离能力强，即使被分析混合物在色谱上没有完全分离开，但通过MS的特征离子质量色谱图也能分别给出它们各自的色谱图??-来进行定性定量； (3)?定性分析结果可靠，可以同时给出每一个组分的分子量和丰富的结构信息； (4)?检测限低，MS具备高灵敏度，； (5)?分析时间快，HPLC?-?MS使用的液相色谱柱为窄径柱，缩短了分析时间，提高了分离效果； (6)?自动化程度高。 三、HPLC-MS 技术应用 液质联用仪，主要应用于药物代谢及药物动力学研究、临床药理学研究、天然药物?(?中草药等?)?开发研究、蛋白与肽类的鉴定、药物筛选、残留分析、毒物分析、环境分析、环保、食品、自来水、卫生防疫等行业。 1 药物分析： ①中草药成分分析 ②中药指纹图谱研究 ③药物代谢研究 ④体内药物动力学研究 2 食品分析： 在食品生产过程中添加防腐剂、抗氧化剂、人工合成色素、甜味剂、保鲜剂等化学物质； 食品在生产、包装和运输过程中可能会被化学物质污染,如发生农药残留、兽药残留等。 3 环境分析：如酞酸酯类化合物主要用作增塑剂大量添加到各种软制品塑料中。此类化合物没有与塑料基质发生聚合,因而随着塑料制品的使用可由塑料中转移到环境中去,造成对土壤、水体等的环境污染。