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Beijing Chaoyang Hospital Affiliate of Capital Medical University RNA的提取、荧光定量PCR Presented by: 贾兴元 2010-6-29 前言 细胞中的RNA 可分为mRNA、 tRNA 、 rRNA 三大类，各种RNA的含量不相同，其中rRNA 约占细胞中RNA含量的80-85%、 tRNA占10-15% 、 mRNA占1-5%。 不同组织总RNA 提取的实质就是将细胞裂解，释放出RNA，并通过不同方式去除蛋白、DNA等杂质，最终获得高纯度RNA产物的过程。 mRNA的应用：RT-PCR, Northern杂交，cDNA文库构建, mRNA末端快速扩增(RACE)，差异表达(DDRT-PCR)，引物延伸反应(Primer Extension)，体外转录(In Vitro RNA Transcription), RNA标记(RNA labeling)，RNA酶保护试验(RNase and S1 Nuclease Protection Assay)，RNA微注射(RNA Microinjection) RNA提取样品的预处理 1、RNA的保护 RNA的提取实验通常比较困难，由于RNA非常容易降解，造成降解的原因： （1）RNA核糖残基的2’和3’位置带有羟基，易被水解； （2