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- 2017-02-05 发布于湖北
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反相高效液相色谱法测定饮料中的咖啡因的含量
前言:
本次实验报告在前言中简单阐述HPLC基本原理,介绍HPLC仪器的结构特点和应用范围;研究对象的化学结构、理化常数和文献报道测定方法。
咖啡因又称咖啡碱,属黄嘌呤衍生物,化学名称1,3,7-三甲基黄嘌呤,可由茶叶或咖啡中提取而得的一种生物碱。它能兴奋大脑皮层,使人精神兴奋。咖啡中含咖啡因1.2%-1.8%,茶叶约含2.0%-4.7%。可乐、APC药片中均含有咖啡因。其分子式为C8H10O2N4,结构式:
一、仪器与试药
高效液相色谱仪(日本岛津)。
咖啡因对照品;甲醇为色谱纯;百事可乐(康师傅乌鲁木齐饮品有限责任公司);红牛(红牛维他命饮料有限公司);叶尔羌茶(新疆叶尔羌茶有限责任公司)。
二、方法与结果
2.1 色谱条件 色谱柱:C18(4.6x150mm,5μm),流动相:甲醇:水=30:70,测定波长280nm,柱温30℃,流速:1ml/min,进样量:10μL。
2.2 系统适用性实验 取供试品20μL进样,记录色谱图,咖啡因峰的保留时间为4.253 min,各峰与相邻峰的分离度为 ,拖尾因子为 ,符合药典规定,理论塔板数按咖啡因峰计算大于2000。对照品及供试品的色谱图如下:
⑴ 对照品的色谱图
⑵ 供试品的色谱图
2.3 溶液制备
精密称取咖啡因对照品10mg
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