反射弧的分析.docx

反射时测定和反射弧分析以及神经干动作电位的测定1.实验目的1.1观察蛙坐骨神经干复合动作电位的基本波形，并了解其产生的基本原理1.2 学习测定蛙离题神经干上神经冲动传导速度的方法和原理1.3 学习测定反射时的方法，了解反射弧的组成1.4 观察反射被阻断的现象2.实验原理2.1 神经干在受到有效刺激以后可以产生复合动作电位，这标志神经发生电位。如果在立体神经干的一段施加刺激，可以使用仪器记录从另一端传来的兴奋活动。若在神经干某一段损坏，则仪器记录到的是单相动作电位。2.2 反射是机体对外界刺激做出的规律性应答。反射活动结构基础称为反射弧，包括感受器、传人神经、神经中枢、传出神经、效应器。反射时，反射弧任一结构受到损坏，反射不能完成。由于脊髓的机能比较简单，所以选用毁脑的蛙作为试验材料。3.实验材料与器材3.1实验材料：蛙(frog)3.2常用手术器械（手术剪、手术镊、手术刀、金冠剪、眼科剪、眼科镊、毁髓针、玻璃分针）、蜡盘、蛙板，玻璃板、固定针、锌铜弓、培养皿或不锈钢盘、污物缸、滴管、纱布、粗棉线、任氏液、2%普鲁卡因、0.5%及1%硫酸溶液、滤纸片、支架、蛙嘴夹、小烧杯、秒表、神经屏蔽盒、PowerLab 10T、刺激线、USB线、电脑4.实验方法与步骤4.1反射时与反射弧的测定4.1.1脊蛙（只毁脑），分离右侧股部坐骨神经穿线备用4.1.2夹在支架上，右后肢最长趾浸入0.5%硫酸溶液中2~3mm(10s),测屈反射时3次，同样测左后肢最长趾的。4.1.3损毁感受器实验4.1.4对照没损毁感受器实验4.1.5测擦或抓反射（搔扒反射）4.1.6麻醉坐骨神经，加药后每隔2min重复步骤（4）（记录加药时间）4.1.7立即重复步骤（5），每隔2min重复一次步骤（5）直到抓反射消失，记录时间4.1.8左侧后肢最长趾反射时有无变化，毁坏脊髓后重复实验，记录结果。4.2坐骨神经干标本的制备4.2.1双毁髓-剥制后肢-分离两后肢4.2.2分离坐骨神经到踝关节附近4.2.3连接实验装置4.2.4设置CH3 BioAmp和Stimulator将神经干标本放入神经屏蔽盒4.2.5检查USB线是否连接，连接刺激线和通道3生物电输入线到相应接头4.2.6打开PowerLab电源，打开Scope软件（或Chart5）4.2.7设置通道3: Ch3 BioAmp：Range 5mV, Filter 20Hz，High Pass 10Hz (调零用DC档），设置Stimulator：单刺激 Delay 120ms ，波宽Duration:10mS，振幅Ampl. 100mV，设置Overlay on Ch B 或 Ch A 或 Top 4.2.8开始实验。点右下角Start ，即可看到刺激输出后得到的动作电位波形图。每点一次START，记录号增加在图下方，调节单刺激持续时间Duration和振幅大小，以及调节放大器HighPass等参数，均对实验结果有影响5.实验结果5.1神经干动作电位的测定5.1.1双相动作电位刺激强度为2.25V时的双相动作电位（1）刺激强度为3.00V时的双相动作电位（2）5．1.2单相动作电位刺激强度为3.25V的单相动作电位5．2反射弧分析5．2.1反射时的测定第一次第二次第三次平均值屈反射5’’486’’288’’236’’16抓反射3’’344’033’’753’’115.2.2反射弧的分析实验项目实验现象记录测左右两后肢最长趾基部左：1’’98右：6’’66测左右两后肢最长趾基部，去趾上皮肤后测去反射没反应测右后肢其他趾屈反射2’’89测右侧背抓反射3’’71右侧坐骨神经滴加普鲁卡因，加药时开始计时，每个2min重复步骤③，记录每次重复反射时的变化加药2分钟后，屈反射消失反射时：屈反射不能出现时每隔2min重复步骤④，记录每次重复反射时的变化加药2分钟后，屈反射消失反射时：测左后肢最长趾屈反射与步骤①比较：3’’06毁坏脊髓，重复步骤⑦没有反应6. 分析与讨论：6.1 复合神经干动作电位的测定?6.1.1双相动作电位从5.1图可以看到双相动作电位呈现先升后降。当复合神经干没有受刺激时，呈现内负（负电位）外正（正电极），故膜外都呈现正电，即外膜与电极所接触的两点之间没有电位差，所以两电极之间也无电位差存在，扫描线为一水平基线。在神经干一端给予电刺激后，则产生一个向两边传导的冲动（负电位），与原来的膜外为正电极相反，产生了电位差（由正变为负），扫描线向上偏转，记录出一个向上的波形。（查阅文献得，负波规定为正）。随后，冲动继续向传导，由一开始刺激处传向两边。当它到达被测电极所在的下方时，由于最开始刺激的神经已经恢复原先的电位水平了（由负变为正），于是被测电极相对于最开始刺激的神经为负，引起扫描线向下偏转，记录出一个向下的