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单分子对荧光共振能量转移（spFRET） 生物物理学系 郑晓惠 学号一 引言 光谱技术是研究生物分子最常用的方法之一。在 其经典公式为 E=R06/(R6+ R06), R0 为能量传递达到 50%的距离。选定供、受体对之后，可将 R0 看作 单分子光谱（single molecule spectroscopy, SMS） 恒量。能量转移的发生将改变供、受体的去偏振 探测技术发展以前，大多数的实验是探测分子的 程度、荧光寿命、荧光强度等，测定这些参数值 综合平均效应，得到的是由大量对象组成的一个 整体所表现出的平均响应和平均值，这一平均效 应掩盖了许多特殊的信息。而单分子探测可对体 系中的单个分子进行研究，通过与时间相关过程 就可得出 E。利用 R0 和实验测得的 E 就可测得供 受体间的距离 R。用此方法测量生色团距离的方法 被称为光谱尺，可测量 1.0-10.0nm 之间的距离。 spFRET是在一个生物大分子或两个相互作用的分 的探测，能实时了解生物大分子构象变化的信息。 子上标记两个不同的荧光基团。同样，当供体的 2002 年美国第 46 届生物物理年会表明单分子仍是 发射光谱与受体的吸收光谱相重叠时，发生共振 生物物理学目前和今后重点发展的研究领域。主 能量转移。通过探测能量转移效率，就可确定两 要的技术手段包括生物大分子荧光光谱，单分子