生物监测叶绿素a解决方案.ppt

叶绿素a的测定 生命组作品 成员：靳丽、阳乐怡、何淑红、左柯凡 2015年5月10日 叶绿素a是什么 ? 叶绿素a是有机物， 不溶于水， 但能溶于丙酮、乙醇等有机溶剂。 究竟是什么 ? 叶绿素a的分子结构由4个吡咯环 通过4个甲烯基（=CH—）连接形成环状结构， 称为卟啉（环上有侧链）。卟啉环中央 结合着1个镁原子，并有一环戊酮（Ⅴ）， 在环Ⅳ上的丙酸被叶绿醇（C20H39OH，分子量893） 酯化、皂化后形成钾盐具水溶性。 二、测定原理 叶绿素a是有机物，不溶于水，但能溶于有机溶剂。 先用醋酸纤维滤膜抽滤水样，然后破碎细胞，用90%丙 硐提取叶绿素a，再用分光光度计测叶绿素a的吸光度， 最后利用公式计算叶绿素a的含量。 一、测定意义 1.是指示浮游植物生物量的一个重要指标 2.是研究水体富营养化的一种有效方法 三、测定方法和步骤 1.水样的采集与保存 湖泊、水库：采样500mL；池塘：300mL 2、 浓缩水样 抽滤 3、取出滤膜在冰箱内低温 干燥6～8h→研磨器（加入少量 碳酸镁粉末及2～3mL 90%的丙酮）， 充分研磨，离心（3000～4000转/分）10分钟 上清液倒入容量瓶。再研磨离心，上清液再转入容量瓶中，重复l～2次，用90%的丙酮定容 4. 将上清液在分光光度计上，用1cm光程的比色皿，分别读取750nm、663nm、645nm、630nm波长的吸光度，并以90%的丙酮作空白吸光度测定 。 四、计算方法 叶绿素a= V--水样体积（L） V1--定容体积（mL） D?--吸光度 δ--比色皿厚度（cm） 五、环境标准 叶绿索a含量（mg/m3） 营养类型 4 贫营养型 4～10 中营养型 10～50 富营养型 50 高度富营养型 湖泊富营养化叶绿素a的评价标准 六、思考 1.测定叶绿素a有何意义？ 2、试述叶绿素a测定的原理。 3、绘制叶绿素a测定的流程图。 201、 谢谢观看！ 生命组作品 、 2015年5月10日